药物的定量分析方法与分析方法验证第五章人黄丽珍54讲解.pptx

药物的定量分析方法与分析方法验证主讲人：黄丽珍第五章

1、体外样品分析前预处理目录2、体内样品分析前预处理3、药物定量分析方法—滴定分析法4、药物定量分析方法—紫外-可见分光光度法

5、药物定量分析方法—荧光分析法6、药物定量分析方法—高效液相色谱法7、药物定量分析方法—气相色谱法8、药物定量分析方法验证（一）目录9、药物定量分析方法验证（二）

药物定量分析方法—高效液相色谱法

高效液相色谱法一概述原理采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。

（1）色谱柱：内径一般为3.9～4.6nm，填充剂粒径为3～10μm。有反相色谱柱、正相色谱柱、离子交换色谱柱、手性分离色谱柱等。二应用1.对仪器的要求和色谱条件高效液相色谱法

（2）检测器：最常用为紫外-可见分光检测器，包括二极管阵列检测器，其他常见的检测器有荧光检测器、蒸发光散射检测器、示差折光检测器、电化学检测器和质谱检测器等。（3）流动相：反相色谱系统的流动相常用甲醇-水系统和乙腈-水系统。二应用1.对仪器的要求和色谱条件高效液相色谱法

二应用高效液相色谱法（1）色谱柱的理论板数（n）：用于评价色谱柱的分离效能，n通常大于2000。2.系统适用性试验n=5.54(tR/Wh/2)2

二应用高效液相色谱法（2）分离度（R）：用于评价待测物质与被分离物质之间的分离程度，是衡量色谱系统分离效能的关键指标。除另有规定，定量分析时R应大于1.5。2.系统适用性试验R=2（tR1–tR2)/(W1+W2)

（3）灵敏度：用于评价色谱系统检测微量物质的能力，通常以信噪比（S/N）来表示。2.系统适用性试验S/N＝2或3，能被检出；S/N＝10，能被定量测定。高效液相色谱法二应用

（4）拖尾因子（T）：用于评价色谱峰的对称性。除另有规定外，峰高法定量时，0.9T1.05。2.系统适用性试验高效液相色谱法T=W0.05h/2d1二应用

（5）重复性：用于评价色谱系统连续进样时响应值的重复性能。2.系统适用性试验高效液相色谱法对照液连续进样5次，峰面积的RSD≤2.0％。二应用

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