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丹青不知老将至,贫贱于我如浮云。——杜甫
40-
免疫分型教程(1)
正常骨髓免疫分型
上图是正常骨髓经CD45、CD71、CD33染色后组成的CD45/SSC、CD71/CD33双参数散点图;
通过这两个组合,能够分辨骨髓的正常细胞、检查是否有异常细胞存在、评估细胞的成熟情
况。
丹青不知老将至,贫贱于我如浮云。——杜甫
CD45/SSC图中可见:
1,CD45强阳性SSC低信号的细胞群为淋巴细胞(褐色细胞群体);
2,中等强度的CD45表达,SSC信号最强的细胞群体为粒细胞(蓝色及红色细胞群体);
3,CD45表达与SSC信号介于淋巴细胞与粒细胞之间的是单核细胞群体(绿色细胞群体);
4,CD45阴性,SSC信号最低的有核红细胞和细胞碎片;
CD33/CD71图中可见:
1,CD33表达最强的单核细胞群体(绿色);
2,粒细胞CD33表达较单核弱,不成熟粒表达CD71,成熟后不表达。
3,淋巴细胞、有核细胞和细胞碎片不表达CD33、CD71。
CD11B/CD15图可用来评估髓系细胞向单核、粒分化的程度(随着髓细胞成熟,细胞逐步获
得CD11B,粒细胞高表达CD15):
1,单核细胞(绿色)高表达CD11B,CD15中等到表达;
2,粒细胞(蓝色及橘红色)高表达CD15,蓝色成熟粒CD11B表达较橘红色不成熟粒细胞强,
幼稚髓细胞仅表达CD15而无CD11B。
3,T、B淋巴细胞不表达CD15、CD11B,NK细胞表达CD11B而无CD15(红色细胞)。
4,有核红细胞及碎片不表达CD15和CD11B。
根据骨髓细胞CD45/SSC图中分布情况设门圈定各类细胞:
R1门为成熟淋巴细胞;
R2门为正常单核细胞位置;
R3门正常粒细胞位置;
R4门为幼稚淋巴细胞出现位置;
R5门为有核红细胞或细胞碎片位置;
R6门为幼稚髓细胞出现位置;
白血病细胞通常会在R4、R6两门位置处出现。
M0免疫分型
M0:急性髓细胞白血病微分化型原始细胞在光镜下类似L2型细胞,核仁明显,胞浆透明,嗜
碱性,无嗜天青颗粒及Auer小体,髓过氧化酶(MPO)及苏丹黑B阳性细胞3%;电镜
下,MPO(+);CD33或CD13等髓系标志可呈(+),淋巴系抗原通常为(-),但有时CD7+,TdT+;部分
急非淋白血病可表现CD7+,TdT。
形态学:幼稚细胞占骨髓有核细胞90%以上;肿瘤细胞不出现AUER小体;粒细胞缺少,MPO或苏单黑染色
阴性。
遗传学:染色体常有复杂的异常,特别是5和7号染色体。当病例伴T(9;22)时会出现淋系抗原。
丹青不知老将至,贫贱于我如浮云。——杜甫
幼稚细胞群体的FS和SS信号低,在CD45/SS点图中特征性地与幼稚淋巴细胞区域相连。幼稚细胞至少表
达一种骨髓抗原:CD13,CD33,但完全缺乏髓系成熟分化抗原:CD11B,CD15和CD16。相当一部分病例TDT
阳性,但在肿瘤细胞上分布不均。肿瘤细胞通常淋系抗原阴性,但有时也会表达CD7或CD4;HLA-DR通常
阳性,CD34则为阴性。有学者指出伴CD7和CD34同时表达的病人预后不佳。检测胞浆内MPO比CD33/CD13
联合检测更为敏感。M0中MPO阳性率一般小于3%,如大于3%则要判定为M1。
M0:HLA-DR+,CD34+,CD13+/-,MPO+,CD14-,CD11b-,TdT-/+to+/-
丹青不知老将至,贫贱于我如浮云。——杜甫
骨髓样本类似纯化的培养细胞,在
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