土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.ppt

中性3～8cm有机质[自读教材·夯基础]30～300温度时间数目稳定计数：当菌落数目稳定时，取同一下的3个平板进行计数，求出，并根据所对应的计算出样品中细菌的数目平均值稀释度稀释度23412．菌种鉴定(1)原理：分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解为，使培养基的增强。(2)方法：在以为唯一氮源的培养基中加入指示剂培养细菌，若指示剂变，可确定该种细菌能够分解尿素。氨碱性尿素酚红红1．当第一次测定时为什么要将稀释的范围放宽一些？提示：为确保能从中选择出菌落数在30～300之间的平板进行计数。2．为什么要选取菌落数目稳定时的记录作为结果？提示：防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。[跟随名师·解疑难]操作中的注意事项无菌操作：铁铲和信封都要灭菌。称取土壤、将称好的土样倒入锥形瓶、稀释土壤溶液，每一步都要在酒精灯的火焰旁进行。做好标记：如在培养皿上注明培养基种类、培养日期以及培养样品的稀释度等。***********第1部分01专题202课题203理解教材新知04把握热点考向05应用创新演练06知识点一07知识点二08考向一09考向二101.测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。2．稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果往往比活菌数目低。3．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作唯一氮源的选择培养基分离该细菌。4．鉴定分解尿素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，据是否变红进行判断。 [自读教材·夯基础]1．筛选菌株的思路(1)自然界中目的菌株的筛选：①依据：根据它对的要求，到相应的环境中去寻找。②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。生存环境TaqDNA聚合酶科目一考试2016年科目一模拟考试题科目二考试2016年科目二考试技巧、考试内容、考试视频(2)实验室中目的菌株的筛选：①原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时其他微生物的生长。②方法：利用选择培养基分离。a．选择培养基：允许微生物生长，同时其他种类微生物生长的培养基。b．实例：选择分解尿素的细菌的培养基，以作为唯一氮源，只有能合成的微生物才能分解尿素。目的菌株抑制或阻止特定阻止或抑制尿素脲酶活菌稀释度稀释涂布平板②计数原则：一般选择菌落数在的平板进行计数。③结果分析：统计的菌落数往往比活菌的实际数目。原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是。(2)其他方法：利用直接计数。30～300低一个菌落显微镜圆褐固氮菌生活于土壤中，能以氮气作为氮源。请探讨、交流实验室分离圆褐固氮菌的方法。01提示：配制无氮培养基作为选择培养基。02 [跟随名师·解疑难]1．选择培养基的类型及作用(1)在培养基中加入某种化学物质。如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的加入指的是在培养基的培养成分的基础上加入。(2)改变培养基中的营养成分。如培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。(3)改变微生物的培养条件。如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。2．统计菌落数目(1)稀释涂布平板法：①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有