药物的定量分析方法与分析方法验证第五章人黄丽珍81讲解.pptx

药物的定量分析方法与分析方法验证主讲人：黄丽珍第五章

1、体外样品分析前预处理目录2、体内样品分析前预处理3、药物定量分析方法—滴定分析法4、药物定量分析方法—紫外-可见分光光度法

5、药物定量分析方法—荧光分析法6、药物定量分析方法—高效液相色谱法7、药物定量分析方法—气相色谱法8、药物定量分析方法验证（一）目录9、药物定量分析方法验证（二）

体外样品分析前预处理

体外样品分析前预处理一概述将待测物纯化或转化为适宜测定形式的过程，有利于提高分析的灵敏度，专属性和准确性等。分析样品预处理体外样品前处理体内样品前处理

体外样品分析前预处理一概述湿法破坏-凯氏定氮法干发破坏-氧瓶燃烧法直接测定水解后测定氧化还原后测定体外样品分析前处理经有机破坏不经有机破坏

结构特征与前处理方法之间的关系：①含卤素有机药物R-X（F，Cl,Br,I）卤素与芳环相连Ar-X结合牢固，需有机破坏卤素与脂肪链相连R-X结合较不牢固，不需有机破坏体外样品分析前预处理二体外样品分析前处理②含金属的有机药物含金属有机药物R-O-Me，有机酸或酚的金属盐/配位化合物；结合不牢固，可直接测定有机金属药物R-Me，结合牢固，适当处理后测定

体外样品分析前预处理（一）不经有机破坏的方法（1）直接测定法例如：富马酸亚铁的含量测定终点：邻二氮菲(Fe3+)溶于热稀硫酸Fe2+Ce4+Fe3+指示剂:邻二氮菲(+Fe2+)红色淡蓝色

（2）经水解后测定法2.1碱水解后测定法适用于X与脂肪链相连的卤代烷烃例如：三氯叔丁醇的含量测定CCl3-(CH3)2OH+4NaOH=(CH3)2CO+3NaCl+HCOONa+2H2ONaCl+AgNO3=AgCl↓+NaNO3AgNO3+NH4SCN=AgSCN↓+NH4NO3（一）不经有机破坏的方法体外样品分析前预处理

体外样品分析前预处理（2）经水解后测定法2.1碱水解后测定法例如：硬脂酸镁、十一酸锌的含量测定Mg(C17H35COO)2+H2SO4=MgSO4+2C17H35COOHH2SO4+2NaOH=Na2SO4+2H2O（一）不经有机破坏的方法

（3）经氧化还原后测定适用于Ar-X的药物例如：泛影酸的含量测定（一）不经有机破坏的方法体外样品分析前预处理

金属原子、X、N、P、S等与C结合牢固者，必须进行有机破坏。（1）湿法破坏H2SO4-HNO3法H2SO4-HClO4法H2SO4-硫酸盐法——凯氏定氮法H2SO4-H2O2法HNO3-KMnO4法等体外样品分析前预处理（二）经有机破坏的方法

（二）经有机破坏的方法体外样品分析前预处理凯氏定氮法三聚氰胺

金属原子、X、N、P、S等与C结合牢固者，必须进行有机破坏。体外样品分析前预处理（二）经有机破坏的方法（2）干法破坏适用于含X、S、P等有机药物分析的前处理，也用于某些药物中Se及As盐的检查

金属原子、X、N、P、S等与C结合牢固者，必须进行有机破坏。2.1高温炽灼法加无水Na2CO3、硝酸镁、氢氧化钙或ZnO以助灰化体外样品分析前预处理（二）经有机破坏的方法注意事项：（1）含挥发金属药物加热或灼烧时，温度应控制在420℃以下。（2）一定要灰化完全（3）经本法破坏后，所得灰分往往不易溶解，但不要轻易弃去。

体外样品分析前预处理（二）经有机破坏的方法2.2氧瓶燃烧法将有机药物放入充满氧气的密闭燃烧瓶中进行燃烧，并将燃烧所产生的待测物质吸收于适当的吸收液中，然后根据待测物质的性质，采用适宜的分析方法进行鉴别、检查或含量测定。特点：简便、快速、破坏完全，尤其适用于微量、半微量样品的分析。

体外样品分析前预处理（二）经有机破坏的方法氧瓶燃烧法-氧瓶燃烧装置及称样方法空心A.燃烧瓶B.铂丝网C.D.盛固体样品滤纸及其折叠法E.F.G.称取液体样品方法7mm50mm30mm尾部7mm13mm20mm25mm35?6mm16?6mm滤纸滤纸AGFEDCB

体外样品分析前预处理（二）经有机破坏的方法氧瓶燃烧法-氧瓶燃烧的操作（1）仪器装置：500ml，1000ml，2000ml，磨口、硬质，玻璃锥形（2）称样：A.固体样品无灰滤纸；B.液体样品纸袋（3）燃烧分解操作法（4）吸收液的选择用于X、S、S