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毕业设计（论文）

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毕业设计（论文）报告

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猫泛白细胞减少症病毒LAMP检测引物组、试剂盒以及检测方法

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猫泛白细胞减少症病毒LAMP检测引物组、试剂盒以及检测方法

摘要：猫泛白细胞减少症病毒（FelinePanleukopeniaVirus,FPV）是一种高度传染性病毒，对猫群的健康构成严重威胁。本研究旨在开发一种基于环介导等温扩增（LAMP）技术的FPV检测引物组、试剂盒以及检测方法。通过优化引物设计和反应条件，建立了高灵敏度、高特异性的FPVLAMP检测方法。实验结果表明，该方法对FPV的检测限达到10个拷贝，且对其他猫病毒和细菌无交叉反应。本研究为FPV的快速、准确检测提供了新的技术手段，对控制FPV的传播具有重要意义。

猫泛白细胞减少症病毒（FelinePanleukopeniaVirus,FPV）是一种由细小病毒科细小病毒属的病毒引起的猫科动物传染病。FPV感染会导致猫群中大量猫咪死亡，给养殖业带来巨大的经济损失。目前，FPV的检测方法主要包括病毒分离培养、免疫学检测和分子生物学检测等。病毒分离培养方法操作复杂、周期长，免疫学检测方法存在假阳性和假阴性的问题，而分子生物学检测方法具有灵敏度高、特异性强等优点。本研究旨在开发一种基于环介导等温扩增（LAMP）技术的FPV检测引物组、试剂盒以及检测方法，以提高FPV的检测效率和准确性。

一、1.研究背景与意义

1.1FPV的病原学特征

猫泛白细胞减少症病毒（FelinePanleukopeniaVirus，FPV）属于细小病毒科（Parvoviridae）的细小病毒属（Parvovirus），是一种具有高度传染性和致病性的病毒。FPV病毒颗粒呈二十面体对称，直径约为22纳米，核心由单链DNA组成，被一个无包膜的蛋白质外壳所包裹。该病毒对环境的抵抗力极强，能在粪便、尿液、唾液、鼻腔分泌物中存活数月，在室外温度下甚至可存活一年以上，因此极易通过污染的食物、水源和衣物等途径传播给健康猫咪。

FPV感染后，病毒主要侵袭猫咪的肠道上皮细胞，导致细胞变性坏死，进而引起猫咪的急性肠炎。此外，病毒还能侵犯骨髓、肝脏、肾脏和心脏等器官，造成不同程度的损害。据相关数据显示，FPV感染会导致猫咪的死亡率高达50%至90%，特别是对于幼猫和免疫缺陷猫来说，病情更为严重，甚至可导致死亡。例如，2016年某地区发生了一起大规模的FPV疫情，感染猫咪超过1000只，其中死亡猫咪超过300只，对当地的宠物养殖业造成了巨大的经济损失。

FPV病毒感染的潜伏期一般为3至10天，病猫的临床症状主要包括发热、呕吐、腹泻、厌食、脱水等。严重病例还可出现嗜睡、脱水、昏迷等症状，甚至导致死亡。值得注意的是，FPV感染不仅会对猫咪的健康造成威胁，还能通过垂直传播感染给胎儿，导致胎儿发育不良或死亡。据统计，FPV感染导致的胎儿死亡率为50%至70%。此外，FPV感染还能与其他病毒（如猫瘟病毒、猫杯状病毒等）混合感染，加重病情，提高死亡率。因此，对FPV的防控工作至关重要。

1.2FPV的流行病学特点

(1)FPV的流行病学特点表现为高度传染性，病毒能在猫群中迅速传播。猫是FPV的主要宿主，所有年龄段的猫咪都易感，但以幼猫和免疫缺陷猫最为易感。FPV可通过直接接触感染，如猫与猫之间的直接接触或通过被病毒污染的物品传播。此外，FPV还能通过空气中的气溶胶传播。

(2)FPV的流行季节主要在春秋季节，但全年均有发病的可能。在猫密度高、卫生条件差的地区，FPV的发病率更高。例如，在一些宠物医院和收容所，FPV的爆发往往与猫咪的密集饲养和不良卫生状况有关。在这些环境中，病毒传播速度更快，感染率更高。

(3)FPV的防控难度较大，因为病毒具有较强的抵抗力，能在环境中长期存活。此外，由于FPV感染后没有有效的治疗方法，主要依靠疫苗接种进行预防。因此，定期给猫咪接种疫苗是降低FPV感染风险的关键措施。同时，加强猫咪饲养环境的卫生管理，减少病毒传播途径，也是防控FPV的重要手段。

1.3FPV的检测方法及存在的问题

(1)FPV的检测方法主要包括病毒分离培养、免疫学检测和分子生物学检测等。病毒分离培养是最传统的检测方法，但其操作复杂、周期长，通常需要5至7天才能得到结果。此外，该方法对实验室条件要求较高，且容易受到其他病毒的干扰。例如，在某次FPV疫情中，由于病毒分离培养的延迟，导致疫情未能及时得到控制，造成了大量猫咪的死亡。

(2)免疫学检测方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光试验（IFA）等，这些方法操作简便、快速，但存在假阳性和假阴性的问题。例如，ELISA