猫泛白细胞减少症病毒FPV BJ05株及其应用[发明专利].docxVIP

毕业设计（论文）

PAGE

1-

毕业设计（论文）报告

题目：

猫泛白细胞减少症病毒FPVBJ05株及其应用[发明专利]

学号：

姓名：

学院：

专业：

指导教师：

起止日期：

猫泛白细胞减少症病毒FPVBJ05株及其应用[发明专利]

摘要：猫泛白细胞减少症病毒（FPV）BJ05株是一种重要的猫类疾病病原体，本研究通过分离纯化FPVBJ05株，对其生物学特性、致病机制及防治策略进行了深入研究。结果表明，FPVBJ05株具有高度的致病性和传播能力，可引起猫类出现严重的临床症状，如发热、食欲减退、腹泻等。本研究成功构建了FPVBJ05株的减毒活疫苗，并通过动物实验验证了其安全性和免疫原性。此外，本研究还揭示了FPVBJ05株的致病机制，为该病毒的防控提供了理论依据。本文旨在为FPVBJ05株的研究提供参考，并为猫泛白细胞减少症的控制提供新的思路。

猫泛白细胞减少症（猫瘟热）是由猫泛白细胞减少症病毒（FelinePanleukopeniaVirus，FPV）引起的一种高度传染性、致死性猫类疾病。FPV是一种单链RNA病毒，属于细小病毒科。自1950年代首次发现以来，FPV已成为全球范围内猫咪的重要病原体之一。FPV感染后，猫咪会出现严重的临床症状，如发热、食欲减退、腹泻、呕吐等，甚至导致死亡。因此，对FPV的研究和防控具有重要意义。本研究旨在通过分离纯化FPVBJ05株，对其生物学特性、致病机制及防治策略进行深入研究，为FPV的防控提供理论依据和技术支持。

一、FPVBJ05株的分离与鉴定

1.1FPVBJ05株的分离

(1)本研究首先采用病毒分离技术，从疑似FPV感染的猫粪便样本中成功分离出病毒。分离过程严格遵循实验室生物安全规范，使用无血清细胞培养系统进行病毒培养。通过连续传代培养，最终获得稳定生长的病毒株，命名为FPVBJ05株。

(2)为了确保分离的病毒株为FPV，我们对其进行了详细的形态学观察和分子生物学鉴定。通过电子显微镜观察，FPVBJ05株呈现典型的细小病毒形态，直径约为20-25纳米。进一步通过RT-PCR和基因测序技术，对病毒基因组的特异性引物和序列进行扩增和比对，确认了分离株为FPV，且与已知的FPV基因序列高度同源。

(3)在分离过程中，我们还对FPVBJ05株的稳定性进行了评估。通过不同培养基和培养条件下的连续传代培养，发现FPVBJ05株具有良好的稳定性，能够在细胞培养系统中持续增殖。这一结果为后续的病毒学研究奠定了基础。

1.2FPVBJ05株的鉴定

(1)对FPVBJ05株的鉴定工作首先从形态学观察入手，利用电子显微镜对病毒颗粒进行观察。结果显示，FPVBJ05株病毒颗粒呈现典型的细小病毒特征，具有高度的规则性，直径约为20-25纳米，表面有明显的20面体对称结构。此外，通过负染技术进一步确认了病毒颗粒的形态，证实了其属于细小病毒科。

(2)在分子生物学层面，我们对FPVBJ05株的基因组进行了详细的分析。通过RT-PCR技术，成功扩增了FPV的核衣壳蛋白基因（N蛋白基因）和聚合酶基因（P蛋白基因），并进行测序。测序结果显示，FPVBJ05株的N蛋白基因和P蛋白基因序列与已知的FPV参考序列具有高度的同源性，证实了其属于FPV。此外，通过生物信息学分析，对FPVBJ05株的遗传进化关系进行了研究，发现其与FPV的A型病毒较为接近。

(3)为了进一步验证FPVBJ05株的感染性，我们进行了病毒接种实验。将FPVBJ05株接种于猫源细胞系中，经过一定时间的培养，观察到细胞出现典型的细胞病变效应（CPE），如细胞圆缩、脱落等。通过免疫荧光技术，成功检测到病毒抗原在感染细胞中的表达，进一步证实了FPVBJ05株的感染性。此外，我们还对FPVBJ05株的致病性进行了评估，发现其能够引起猫源细胞系的细胞凋亡，表明FPVBJ05株具有致病潜力。这些鉴定结果为后续的FPVBJ05株研究提供了可靠的科学依据。

1.3FPVBJ05株的生物学特性

(1)在研究FPVBJ05株的生物学特性过程中，我们首先对其感染周期进行了详细分析。通过细胞培养实验，观察到FPVBJ05株的感染周期较短，大约需要48小时即可完成一个完整的感染周期。在这一过程中，病毒能够有效地进入宿主细胞，复制其遗传物质，并组装新的病毒颗粒。

(2)对于FPVBJ05株的复制效率，我们通过实时荧光定量PCR技术进行了检测。结果显示，FPVBJ05株在细胞培养中的复制效率较高，病毒滴度在感染后24小时内迅速上升，达到峰值后逐渐下降。这一特性使得FPVBJ05株在短时间内能够大量繁殖，增加了其传播和感染的风险。

(3)在