实验十微生物细胞大小的测定省公开课一等奖全国示范课微课金奖.pptx

试验十微生物细胞大小测定

一、试验目标：

二、试验原理：

三、试验材料：

四、试验内容：

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一、试验目标：

了解目镜测微尺和镜台测微尺结构和使用原理；

掌握微生物细胞大小测定方法。

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二、试验原理：

目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10mm长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中隔板上(此处恰好与物镜放大中间像重合)来测量经显微镜放大后细胞物象。因为不一样目镜、物镜组合放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示长度也不一样，所以目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表相对长度。

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目镜测微尺

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镜台测微尺是中央部分刻有准确等分线载玻片，普通将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺。

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三、试验用具：

1．活材料：安琪酵母菌悬液

2．器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、盖玻片、载玻片、滴管、擦镜纸。

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四、试验方法及步骤：

1．目镜测微尺校正

把目镜上透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝下轻轻地装入目镜隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。

先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺刻度平行，移动推进器，使两尺重合，再使两尺“0”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合刻度(图20-3)，计数两重合刻度之间目镜测微尺格数和镜台测微尺格数。

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因为镜台测微尺刻度每格长l0μm，所以由以下公式能够算出目镜测微尺每格所代表长度。

比如目镜测微尺5小格恰好与镜台测微尺5小格重合，已知镜台测微尺每小格为l0μm，则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/5＝10μm。

用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表长度。

因为不一样显微镜及附件放大倍数不一样，所以校正目镜测微尺必须针对特定显微镜和附件（特定物镜、目镜、镜筒长度）进行，而且只能在特定情况下重复使用，当更换不一样放大倍数目镜或物镜时，必须重新校正目镜测微尺每一格所代表长度。

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2．细胞大小测定

(1)取一滴酵母菌菌悬液制成水浸片或HD-1菌悬液。

(2)移去镜台测微尺，换上酵母菌水浸片，先在低倍镜下找到目标物，然后在高倍镜下用目镜测微尺来测量酵母菌（或HD-1）菌体长，宽各占几格（不足一格部分预计到小数点后一位数）。测出格数乘上目镜测微尺每格校正值，即等于该菌长和宽。普通测量菌体大小要在同一个标本片上测定10—20个菌体，求出平均值，才能代表该菌大小。而且普通是用对数生长久菌体进行测定。

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