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ICS65.020.20CCSB05
21
辽宁省地方标准
DB21/TXXXX—2025
百合鳞片组织培养生产技术规程
Technicalregulationfortheproductionoflilyscaletissueculture
(草稿)2025.01
2025-XX-XX发布2025-XX-XX实施
辽宁省市场监督管理局发布
I
DB21/TXXXX—2025
前言
本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由辽宁省农业农村厅提出并归口。
本文件起草单位:辽宁省农业科学院,辽宁省农业发展服务中心。
本文件主要起草人:杨迎东,胡新颖,宋国柱,贾慧群,周俐宏,李雪艳,白一光,王丽静,李伟,王伟东,张睿琪,李世娟,程海龙,张玉明,董岩。
本文件发布实施后,任何单位和个人如有问题和意见建议,均可以通过来电和来函等方式进行反馈,我们将及时答复并认真处理,根据实际情况依法进行评估及复审。
归口管理部门联系方式:辽宁省农业农村厅(沈阳市和平区太原北街2号),联系电话:024文件起草单位联系方式:辽宁省农业科学院(沈阳市东陵路84号),联系电话:024
1
DB21/TXXXX—2025
百合鳞片组织培养生产技术规程
1范围
本标准规定了以百合鳞片为外植体进行组织培养过程中的外植体选择、消毒、接种方式,基本培养基选择,初代诱导培养、结球培养、增殖扩繁、生根培养中添加植物生长调节剂种类与浓度,培养条件,出库变温处理及炼苗移栽等技术内容。
本文件适用于以百合鳞片为外植体进行离体培养与扩繁的组培小鳞茎工厂化生产。
2规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
植物组织培养planttissueculure
在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞或原生质体,培养在人工配制的培养基上,人为控制培养条件,使其生长、分化、增殖,发育成完整植株或生产次生代谢物质的过程和技术。
3.2
外植体explant
用于离体培养的细胞、组织或器官(茎、叶、花器官等)统称为外植体。3.3
培养基culturemedium
提供植物生长发育所需各种养分的介质,主要包括水、无机盐、有机物、凝固剂以及植物生长调节物质等组成。
3.4
初代诱导培养primaryculture
外植体初次接种到培养基中,诱导分化出不定芽、愈伤组织、不定根、小鳞茎等的培养过程。3.5
结球培养bulbletexpandculture
2
DB21/TXXXX—2025
初代培养获得的小鳞茎转接到添加特定物质的培养基中,促进小鳞茎膨大生长,形成大规格鳞茎的过程。
3.6
增殖扩繁multiplicationandpropagation
将试管小鳞茎转接到增殖培养基中,促进试管苗数量扩增,加速繁殖的过程。3.7
生根培养rootingculture
培养材料达到一定数量,大小符合移栽规格要求时,转接到生根培养基中诱导生根,培养生根苗的过程。
3.8
变温处理poikilothermictreatment
生根的试管小鳞茎移栽前,需经过常温-低温-常温的变温处理过程,使其打破休眠和更好的适应外界环境变化。
3.9
炼苗移栽acclimatizationandtransplant
在条件可控的保护设施中,采取逐步通风、控温、遮光、保湿等措施,使幼苗逐步适应外界环境,将小鳞茎从瓶中取出,经过清洗、消毒、沥干水份等操作栽植于培养基质中的过程。
4外植体的选择与消毒
4.1外植体的选择
国外进口经病毒检测无毒的百合种球,种球周径大于12cm,选取健康、无机械损伤和病虫害鳞茎的中、外层鳞片为外植体。
4.2外植体消毒
洗净鳞片表面泥土等污物,洗衣粉水浸泡20min~30min,流水冲洗至少30min,将鳞片放入无菌培养瓶中盖严盖子,放置到超净工作台上。取无菌烧杯,用酒精灯灼烧杯口和瓶身消毒,将鳞片倒入烧杯中,加入75%酒精,没过鳞片,匀速晃动消毒30s~45s(时间根据鳞片大小确定)。倒掉酒精,加入2%次氯酸钠,没过鳞片,匀速晃动消毒15min~20min(时间根据鳞片大小确定),倒掉次氯酸钠溶液,加入无菌水,没过鳞片,匀速
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