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动物细胞融合技术
含义
动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞
的技术。
结果
融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。
原理
与植物原生质体融合的基本原理相同。;
动物细胞融合技术
方法
常用方法有:
1.化学法:PEG融合法
2.物理法:电融合法
3.生物法:灭活病毒诱导法等。;
动物细胞融合技术
意义
细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。
成果
■人们可以按照预先的设计使不同细胞融合,至今,种间、属间、科间,甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得了成功。
■目前,这一技术已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段,特别是利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。;;;;
技术的产生
■1975年,英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒在前人基础上设计了一个创造性的方案:把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞融合,
得到的融合细胞就可能大量增殖,产生足够数量的特定抗体。
■根据该设想,通过实验,他们得到了单克隆抗体。
■由于这一贡献,米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖。;
诱导融合
培养
骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合;;
单克隆抗体的特点
能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备。;
【思考·讨论】单克隆抗体的应用
资料1使用高效的细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞。但细胞毒素没有特异性,在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害,这限制了它在临床上的应用。抗体—药物偶联物(antibody-drugconjugate,ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成,它的作用机制如下图;
【提示】可以用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗。一些作用于细胞信号转导通路的药物可以通过阻断肿瘤细胞的???号通路来抑制其生长,理论上也可以将这些药物与单克隆抗体结合进行治疗。;
【思考·讨论】单克隆抗体的应用
资料2用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”,在妊娠第8天就可以作出诊断,这比原来的诊断方法提前了10d左右,可以避免孕妇在不知道妊娠的情况下因服用药物而对胎儿造成不利影响。该方法检测的准确率在90%以上。;
【提示】单克隆抗体在临床上的应用涉及治疗、诊断等方面。单克隆抗体药物已被广泛用于肿瘤、自身免疫病等疾病的治疗,如利妥昔单抗被用于治疗复发难治的低分化B细胞淋巴瘤;曲妥珠单抗被用于治疗乳腺癌等。在临床诊断方面,单克隆抗体被广泛用于一些感染性疾病的检测、肿瘤的诊断、激素和细胞因子的测定等。以单克隆抗体在诊断肿瘤方面的应用为例,用放射性同位素或荧光标记抗肿瘤表面抗原的单克隆抗体,可以用这些抗体来对体内的肿瘤进行定位辅助诊断并确定肿瘤的复发与转移等。;
应用
■广泛用作诊断试剂,在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。
例如,利用同位素或荧光标记的单克隆抗体在特定组织中成像的技术,
可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。
■运载药物。
■单克隆抗体自身也能用于治疗疾病。在医药领域,单克隆抗体药物占有非常重要的地位。2015年,全球销售额排名前十位的药物中,单克隆抗体药物就有5种。同年,我国的单克隆抗体药物市场规模已达72亿元。;
2019人教版高中生物选捧性必修3课件
本课学习结束
预习:动物体细胞核移植技术和克隆动物;
杂交瘤细胞的培养和筛选
用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞
(每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞)
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