第八章弧菌科临床微生物检验技术网络资源共享讲解.ppt

标本（米泔水样便、呕吐物）快速诊断直接涂片染色动力、制动试验增菌培养（碱性蛋白胨水）分离培养（TCBS、碱性琼脂平板）血清学鉴定生化鉴定、分型确诊报告初步报告霍乱弧菌的检验程序注意事项：标本以粪便为主，采集的标本应及时接种于碱性蛋白胨水增菌。不能及时接种者，应将标本置于文腊二氏保存液或卡布运送培养基中由专人运送。（一）快速诊断：1．直接涂片革兰染色镜检：鱼群状排列的G—弧菌2．悬滴法观察动力：穿梭或流星样运动3．制动试验：若标本经检查发现动力和菌体形态均典型（流星样运动），可作制动试验（加入O1群霍乱弧菌多价血清后动力消失）。在作细菌培养的同时，进行该项检查，可对50~85%的阳性标本提早作出初步诊断。霍乱弧菌的鉴定（二）分离培养：1．培养基的选择：现多采用先以碱性蛋白胨水增菌，再用TCBS琼脂和碱性琼脂平板分离培养，挑取可疑菌落进行鉴定。（三）血清学鉴定确定血清群：取可疑菌落与O1群多价抗血清做凝集试验，确定属于01群群还是非O1群霍乱弧菌确定血清型：属于O1群，再取菌分别与O1群单价分型血清A、B、C做凝集试验霍乱弧菌的鉴定血清型O1群多价血清O1群单价血清ABC小川型+++-稻叶型++-+彦岛型++++3.生物分型：根据生物学特性，做生化试验，确定是古典生物型还是El-Tor生物型补充：防治原则1.控制传染源2.切断传播途径：改善社区环境，加强水源管理3.提高易感者免疫力：疫苗预防接种4.治疗：及时补充液体和电解质霍乱弧菌鉴别要点1.鱼群状排列的G—弧菌2.动力活泼3.制动试验阳性4.菌落形态5.生化试验6.血清学鉴定弧菌属—副溶血性弧菌医学技术系微免教研室临床微生物检验技术网络资源共享课程它是一种嗜盐性弧菌，在不含NaCl的培养基中不生长，因此分离培养及鉴定用的培养基或生化反应管均含有一定浓度的NaCl，以35g/L最为适宜。在100g/LNaCl中不生长。人由于食入污染本菌而未充分加热的海产品或盐腌制食物而引起食物中毒和急性腹泻。该菌于1950年首次在日本大阪引起食物中毒的暴发流行，因食用沙丁鱼。神奈川现象(KP）：溶解兔血及人血，不溶解马血。副溶血性弧菌临床意义：（一）致病物质：粘附因子和毒素，前者主要是菌毛，后者有副溶血性弧菌耐热性溶血素及其类似毒素，KP阳性菌株产生副溶血性弧菌耐热性溶血素，而KP阴性菌株产生副溶血性弧菌耐热性溶血素类似毒素。（二）所致疾病：食物中毒和急性胃肠炎副溶血性弧菌微生物学检验：1.标本采集：采集患者的粪便、肛拭、可疑食物等。2.增菌培养：接种于3.5%NaCl蛋白胨水，350C增菌培养6-9h，出现菌膜，即可分离培养。3.分离培养：TCBS琼脂平板或3.5%NaCl琼脂平板。副溶血性弧菌取可疑菌落进一步检验：（1）菌落特征：在SS平板上不易刮下，48小时后菌落牢固地粘在培养基上。在TCBS上呈蓝绿色菌落（不发酵蔗糖）——与霍乱弧菌鉴别。副溶血性弧菌副溶血性弧菌在TCBS上的生长现象——绿色菌落MAC血平板中国兰（2）G-，直或微弯的杆菌，多形性，动力活泼。（3）氧化酶+，KIA：KA－－，MIU++－，（4）?嗜盐试验：0%NaCl－，1%NaCl+，3%NaCl+，7%NaCl+，10%NaCl－。（5）鉴定：应与溶藻性弧菌鉴别：副溶血性弧菌气单胞菌属医学技术系微免教研室临床微生物检验技术网络资源共享课程（一）G-短杆菌，单端鞭毛。（二）在血皿上生长：灰白色菌落，β溶血；在肠道选择性培养基上，形成无色菌落。（三）在TCBS上生长不良；对弧菌抑制剂0/129耐药。——与弧菌属和邻单胞菌属的鉴别点（四）生化反应（P149）：KIA：KA+/--，MIU++-，氧化酶+，触酶+65g/LNaCl-，O/129R（五）所致疾病：腹泻、伤口感染、败血症。气单胞菌属气单胞菌属气单胞菌属邻单胞菌属医学技术系微免教研室临床微生物检验技术网络资源共享课程（一）只有一个种即类志贺邻单胞菌。（二）与志贺菌属细菌鉴别：类志贺邻单胞菌氧化酶+，动力+，而志贺菌属细菌则相反。