油辣椒食品中环氧大豆油的测定.docxVIP

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食品安全地方标准油辣椒食品中环氧大豆油的测定液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了油辣椒食品中环氧大豆油的液相色谱-串联质谱测定方法。本文件适用于油辣椒食品中环氧大豆油的测定。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样经二氯甲烷提取、反相色谱柱分离，用液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。

5试剂和材料

5.1标准品和试剂

5.1.1环氧大豆油（CAS号：8013-07-8，纯度≥99.5%）。

5.1.2二氯甲烷：色谱纯。

5.1.3丙酮：色谱纯。

5.1.4冰乙酸：≥99.5%。

5.1.5乙腈：色谱纯。

5.2试剂配制

5.2.115mmoL/L乙酸溶液：准确称取0.9g乙酸至1000mL的容量瓶中，用纯水定容至刻度，充分摇匀。

5.2.2乙酸-乙腈溶液（50/850）：将15mmoL/L乙酸溶液和乙腈按50﹕850的体积比混合均匀。

5.3标准溶液配制

5.3.1标准储备液（5g/L）：准确称取0.5g环氧大豆油（精确至0.0001g）至100mL容量瓶中，用二氯甲烷定容至刻度，充分摇匀。

5.3.2标准工作液（500μg/mL）：吸取上述标准储备液（5g/L）1mL于10mL的容量瓶中，加二

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氯甲烷稀释定容至刻度，摇匀，得500μg/mL的标准工作液。

5.3.3标准系列工作溶液：选用相应的不含环氧大豆油的油类基质，分别吸取20μL、40μL、100μL、200μL、400μL、1000μL的标准工作液至10mL的容量瓶中（容量瓶中已准确称取2.00g的不含环氧大豆油的油类基质），用二氯甲烷定容至刻度，涡旋混匀，配制成浓度为1μg/mL、2μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL标准系列工作溶液。在实际样品测定中，可根据样品浓度调整标准系列工作液的浓度范围。

5.4材料

5.4.1有机滤膜（孔径为0.22μm）。

5.4.225mL或50mL的具塞玻璃离心管。

注：除另有说明外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

6仪器和设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。

6.2分析天平：感量0.0001g和0.01g。

6.3离心机：不低于3000r/min。

6.4振荡器。

6.5涡旋混合器。

6.6均质仪器。

7试验方法

7.1试样的制备

取油辣椒独立包装产品，置于不锈钢均质器中，粉碎混匀后，待称样处理。

7.2样品前处理

准确称取样品2g（精确至0.01g）于具塞玻璃离心管中，加入8mL二氯甲烷提取，涡旋振荡提取5min后，于3000r/min的离心机中离心5min，转移上清液至10mL容量瓶中，用二氯甲烷定容至刻度，摇匀后，过有机滤膜上机。

7.3仪器参考条件

7.3.1液相参考色谱条件

液相参考色谱条件如下：

a)色谱柱：C18色谱柱（2.1mm×100mm，1.7μm）或采用相同效果色谱柱，柱温为35℃;

b)流动相：A为50/850（V/V），15mmol乙酸/乙腈，B为丙酮；具体洗脱程序见表1，流速为0.4mL/min，进样量5μL。

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表1流动相梯度洗脱程序

时间（min）

A（%）

B（%）

0

95

5

3

95

5

11

90

10

14

90

10

15

12

88

25

12

88

26

95

5

30

95

5

7.3.2质谱参考条件

质谱参考条件如下：

a)离子化模式：电喷雾电离正离子模式（ESI+）；

b)质谱扫描方式：多反应离子监测（MRM）；

c)其他参考质谱条件：见附录A。

7.4定性、定量测定

7.4.1根据试样中被测物的含量，选取响应值适宜的标准工作液进行分析。对标准工作液、样液及空白试验溶液等体积参插进样测定。标准工作液和待测样液中环氧大豆油的响应值均应在仪器线性相应范围内。如果含量超过标准曲线范围，应稀释到合适的浓度后再进行分析。

7.4.2在相同试验条件下，试样中被测物的色谱峰保留时间与标准工作液中的组分一致；且试样中定性离子的相对丰度与浓度相当的标准工作液的定性离子相对丰度相比，相对丰度（k）偏差不超过表2规定的范围，则可判断试样中存在该组分。

7.4.3标准品色谱图参见附录B。

表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差