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多肽链合成时,需ATP、GTP作为供能物质,并需Mg2+、K+参与。氨基酸活化时需消耗2分子高能磷酸键,肽键形成时又需消耗2分子高能磷酸键,故缩合一分子氨基酸残基需消耗4分子高能磷酸键。7.供能物质和无机离子第23页,共44页,星期日,2025年,2月5日四、翻译的方向mRNA的阅读方向为5′→3′肽链的延伸方向为氨基端→羧基端第24页,共44页,星期日,2025年,2月5日第二节翻译和翻译后加工蛋白质生物合成过程包括三大步骤:①氨基酸的活化;②活化氨基酸在核蛋白体上的缩合(翻译);③多肽链合成后的加工修饰。第25页,共44页,星期日,2025年,2月5日由氨基酰tRNA合成酶催化,特异的tRNA3’端CCA上的2’或3’位自由羟基与相应的氨基酸以酯键相连接,形成氨基酸tRNA,从而使活化氨基酸能够被搬运至核糖体上参与多肽链的合成。氨基酰tRNA的合成,可使氨基酸①活化;②搬运;③定位。一翻译的过程(重点)
1.氨基酸的活化第26页,共44页,星期日,2025年,2月5日2.活化氨基酸的缩合过程可分为起动、延长和终止三个阶段,这三个阶段在原核生物和真核生物类似。第27页,共44页,星期日,2025年,2月5日(1)起动阶段30S起动复合物的形成mRNA的识别70S起动复合体的形成第28页,共44页,星期日,2025年,2月5日在起动因子的促进下,30S小亚基与mRNA的起动部位,起动氨基酰tRNA(fmet-tRNAfmet)和GTP结合,形成复合体。30S起动复合物的形成第29页,共44页,星期日,2025年,2月5日原核mRNA的起动部位由一段富含嘌呤的特殊核苷酸顺序组成,称为SD序列(核糖体结合位点,RBS),可被核蛋白体小亚基辨认结合。真核生物中的mRNA具有帽子结构,已知需一种特殊的帽子结合蛋白(CBP)以识别此结构。mRNA的识别第30页,共44页,星期日,2025年,2月5日70S起动复合体的形成IF3从30S起动复合体上脱落,50S大亚基与复合体结合,形成70S起动前复合体。GTP被水解,IF1和IF2从复合物上脱落。此时,tRNAfmet的反密码UAC与mRNA上的起动密码AUG互补结合,tRNAfmet结合在核蛋白的给位(P位)。第31页,共44页,星期日,2025年,2月5日(2)肽链延长阶段进位成肽移位第32页,共44页,星期日,2025年,2月5日与mRNA下一个密码相对应的氨基酰tRNA进入核糖体的受位。此步骤需GTP,Mg2+,和EF参与。进位第33页,共44页,星期日,2025年,2月5日成肽在转肽酶的催化下,将给位上的tRNA所携带的甲酰蛋氨酰基或肽酰基转移到受位上的氨基酰tRNA上,与其α-氨基缩合形成肽键。此步骤需Mg2+,K+。给位上已失去蛋氨酰基或肽酰基的tRNA从核糖体上脱落。第34页,共44页,星期日,2025年,2月5日核糖体向mRNA的3‘-端滑动相当于一个密码的距离,同时使肽酰基tRNA从受位移到给位。此步骤需EF(EFG)、GTP和Mg2+参与。此时,核糖体的受位留空,与下一个密码相对应的氨基酰tRNA即可再进入,重复以上循环过程,使多肽链不断延长。移位第35页,共44页,星期日,2025年,2月5日核糖体沿mRNA链滑动,不断使多肽链延长,直到终止信号进入受位。1.识别:RF识别终止密码,进入核糖体的受位。?2.水解:RF使转肽酶变为水解酶,多肽链与tRNA之间的酯键被水解,多肽链释放。?3.解离:通过水解GTP,使核糖体与mRNA分离,tRNA、RF脱落,核糖体解离为大、小亚基。(3)肽链终止阶段第36页,共44页,星期日,2025年,2月5日多核糖体在蛋白质生物合成过程中,常常由若干核糖体结合在同一mRNA分子上,同时进行翻译,但每两个相邻核蛋白之间存在一定的间隔,形成念球状结构。由若干核糖体结合在一条mRNA上同时进行多肽链的翻译所形成的念球状结构称为多核糖体。第37页,共44页,星期日,2025年,2月5日多肽链合成的能量消耗多肽链合成的能量主要由ATP和GTP提供,若n个氨基酸合成一条多肽链n个氨基酸分子的活化(ATP→AMP=2ADP)2n个70s起始复合物的形成(GTP→GDP+Pi)1个(n-1)个氨酰-tRNA进入核糖体A位点(GTP→GDP+Pi)(n-1)个(n-1)次核糖体移位(GTP→GDP+Pi)(n-1)个共(4n-1)个第38页,共44页,星期日,2025年,2月5日二、多肽链
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