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ICS11.220
CCSB41
团体标准
T/CVMAxxx—xxxx
山羊痘病毒和绵羊痘病毒通用型荧光PCR
检测方法
UniversalfluorescentPCRdetectionmethodforgoatpoxvirusandsheep
poxvirus
(征求意见稿)
XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施
中国兽医协会发布
T/CVMAxxx—xxxx
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由中国海关科学技术研究中心提出。
本文件由中国兽医协会归口。
本文件起草单位:
本文件起草人:
I
T/CVMAxxx—xxxx
山羊痘病毒和绵羊痘病毒通用型荧光PCR检测方法
1范围
本文件规定山羊痘病毒和绵羊痘病毒通用型荧光PCR检测方法。
本文件适用于山羊痘和绵羊痘病毒的检测及其流行病学调查、诊断、检疫和监测。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范
NY/T3186羊冷冻精液生产技术规程
高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件。
实时荧光PCR:实时荧光聚合酶链式反应(Real-timepolymerasechainreaction)
Ct值:每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值所经历的循环数(cyclethreshold)
DNA:脱氧核糖核苷酸(Deoxyribonucleicacid)
GPTV:山羊痘病毒(goatpoxvirus)
SPPV:绵羊痘病毒(sheeppoxvirus)
PBS:磷酸盐缓冲液(Phosphatebufferedsaline)
Taq酶:TaqDNA聚合酶(TaqDNAploymerase)
TEN缓冲液:Tris-EDTA缓冲液
5试剂和耗材
5.1试剂
5.1.1DNAzol,商品化DNA抽提试剂,于4℃~8℃保存。
5.1.2无水乙醇,-20℃预冷。
1
T/CVMAxxx—xxxx
5.1.375%乙醇,无水乙醇和双蒸水配制,-20℃预冷。
5.1.48mMNaOH溶液,配制见附录A。
5.1.5PBS缓冲液,0.01mol/LPBS,pH7.4,配制见附录A。
5.1.6Taq酶及10倍Taq酶反应缓冲液:Ta
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