临床相关免疫讲解.ppt

根据抗原的性质、结合反应的现象、参与反应的成分等因素分类：1.凝集反应2.沉淀反应3.补体参加的反应4.免疫标记技术（一）Ag-Ab反应的基本检测方法颗粒性Ag＋相应抗体Ab→凝集块凝集反应①直接凝集②间接凝集③间接凝集抑制试验④协同凝集试验可溶性Ag＋相应抗体Ab→沉淀现象①单向免疫扩散②双向免疫扩散③免疫电泳④免疫比浊沉淀反应用荧光素、酶、放射性核素或化学发光物质等标记抗体或抗原，进行抗原-抗体反应的检测，是目前应用最为广泛的免疫学检测技术酶联免疫吸附试验免疫荧光法免疫印迹法免疫金标技术放射免疫测定法免疫细胞的检测1.淋巴细胞及亚群的分离2.免疫细胞功能测定T细胞功能测定和B细胞功能测定外周血单个核细胞(PBMC)的分离：葡聚糖－泛影葡胺（即淋巴细胞分离液）密度梯度离心法。1.淋巴细胞及亚群的分离亚群分离1.尼龙棉分离法2．E花环分离法3．洗淘法4．流式细胞术(FCM)5．磁珠分离技术2.免疫细胞功能测定B细胞功能测定1.B细胞增殖(转化)试验2.溶血空斑形成试验3.酶联免疫斑点法(ELISPOT)T细胞功能测定1.T细胞增殖(转化)试验2.T细胞介导的细胞毒试验：CTL（三）免疫分子的检测1.免疫球蛋白测定检测血清含量高IgG、IgA和IgM用免疫比浊法；检测IgD和IgE用ELISA、RIA等灵敏度高的方法。诊断免疫球蛋白异常性疾病（如骨髓瘤、性联无丙种球蛋白血症等），用免疫电泳等方法。血清总补体活性测定常采用50%补体溶血法（CH50。2.补体测定3.细胞因子（CKs）检测:ELISA、RIA和FCM等方法三、细胞因子（CKs）检测依据抗原表位刺激机体免疫应答的强弱，可将其分为两类：1.优势表位（dominantepitope），其具有强免疫原性，在抗原初始接触免疫细胞时，可首先激发免疫应答；2.隐蔽表位（crypticepitope），其隐藏于抗原大分子内部或密度较低，在后续应答过程中才可激活免疫细胞。已发现，特定抗原刺激机体后，免疫系统首先针对优势表位产生应答，但往往尚不足以清除该抗原，随着免疫应答过程的持续，机体可相继针对更多抗原表位（包括隐蔽表位）产生应答，此现象称为表位扩展（epitopespreading）***过继免疫是把致敏淋巴细胞（具有特异免疫力的）或致敏淋巴细胞的产物（例如转移因子和免疫核糖核酸等）输给细胞免疫功能低下者（如肿瘤病人），使其获得抗肿瘤免疫力。*（三）免疫缺陷病的实验室诊断1.外周血淋巴细胞计数简便或筛选方法。2.淋巴结、直肠粘膜活检，查淋巴细胞或浆细胞。3.骨髓检查各时期细胞的发育和增生状况。4.免疫学检查为主要的检测和诊断方法。5.分子生物学方法检测为主要通过DNA检测发现基因缺陷或缺损的部位。（四）免疫缺陷病的治疗原则治疗基本治疗原则：尽可能减少感染并及时控制感染；通过过继免疫细胞或移植器官以代替受损或缺失的免疫系统组分。三、肿瘤免疫肿瘤抗原是指细胞癌变过程中出现的新抗原、肿瘤细胞异常或过度表达的抗原物质的总称。分类：①根据特异性分类，肿瘤特异性抗原（TSA）和肿瘤相关抗原（TAA）。②根据产生机制分类，突变基因或癌基因的表达产物，致癌病毒表达肿瘤抗原，异常表达的细胞蛋白，胚胎抗原，组织特异性分化抗原和糖基化等原因导致异常的细胞蛋白及其产物。(一)机体对肿瘤的主要免疫效应机制1.T细胞介导抗肿瘤作用：Th1和Tc细胞2.固有免疫细胞的抗肿瘤效应：NK细胞、巨噬细胞、NKT细胞及γδT细胞等NK细胞的抗肿瘤作用巨噬细胞的抗肿瘤作用3.免疫效应分子的抗肿瘤作用①抗体在抗肿瘤免疫中的作用②其他免疫效应分子在抗肿瘤免疫中的作用（二）肿瘤的免疫逃逸机制1、肿瘤细胞的抗原缺失和抗原调变2、肿瘤细胞MHCⅠ类分子表达低下3、肿瘤细胞共刺激信号异常4、肿瘤细胞表达或分泌免疫抑制分子，肿瘤细胞可通过分泌TGF-?、IL-10等抑制性细胞因子或其他免疫抑制物质抑制作用。5、肿瘤细胞的抗凋亡作用6、某些肿瘤细胞表面可表达FasL和抑制分子，诱导特异性T细胞凋亡和抑制T的活化和增殖。7、肿瘤细胞诱导调节性T细胞抑制机体免疫应答8、肿瘤微环境和宿主免疫功能低下四、移植免疫移植指应用异体（或自体）正常细胞、组织、器官置换病变的或功能缺损的细胞、组织、器官，以维持和重建机体生理功能。移植分为4类①自体移植