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职业教育医学检验技术专业教学资源库
临床输血检验技术
HLA抗原检测技术
学习目标
1.熟悉HLA血清学分型试验的原理及质量控制。
2.淋巴细胞毒交叉配合试验的原理及质量控制。
3.HLA分子生物学分型方法
HLA血清学分型试验
抗原与抗体结合
+补体
台盼蓝染液
当特异性抗体与待检淋巴细胞表面HLA分子
结合后，激活补体，使细胞膜通透性增加或
细胞死亡，加入染料后在显微镜下可见结合
补体的细胞被活性染料着色。
HLA血清学分型试验
分离淋巴细胞
HLA血清学分型试验
微量淋巴细胞毒试验
待检淋
巴细胞兔补体5%伊红
悬液
静置30-40分钟
静置60-70分钟
死细胞体积大，着黑色，无折光性；活细胞
大小正常，未着色，折光性强，较透亮；
HLA血清学分型试验
质量控制
孵育温度和时
HLA抗原抗体淋巴细胞其他
间
•最好选用单克•要求活性和纯•严格掌握孵育•补体
隆抗血清度高时间•染液应进行预
•抗体效价适宜•浓度为2～•最适温度为试验；用甲醛
固定
•存在剂量效应4×106/mL20-25℃
•设置阳性和阴
•病理状态下
性对照
HLA可能会表
达异常
想一想
1．由HLA抗原与HLA抗体引起的输血不良反应是（）。
A．过敏性输血反应B．溶血性输血反应
C．输血相关性循环超负荷D．输血相关性急性肺损伤
2．有关微量淋巴毒试验的特性描述错误的是（）。
A．死细胞明亮折光性强B．需要活的淋巴细胞
C．HLA抗原指定的标准方法D．一般在相差显微镜下观察结果
3.有关HLA基因分型PCR－SSP方法描述错误的是（）。
A．是目前大多数实验室常用的方法之一B．可能出现假阳性条带或漏孔现象
C．具有快速、耗时较短和结果判断简便的特点
D．引物5＇端第一个碱基与模板配对起关键作用
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