DB21T3054 犬巴贝斯虫荧光定量PCR检测方法.pdf

ICS11.220

B41

DB21

辽宁省地方标准

DB21/T3054—2018

犬巴贝斯虫荧光定量PCR检测方法

DetectionoffluorescentquantitationPCRforBabesiacanis

2018-10-30发布2018-11-30实施

辽宁省市场监督管理局发布

DB21/T3054—2018

目次

前言II

1范围1

2规范性引用文件1

3缩略语1

4原理1

5仪器和器材1

6试剂和引物2

7样品的采集和前处理2

8操作步骤2

9检测过程中防止交叉污染的措施3

10废弃物处理4

I

DB21/T3054—2018

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由辽宁省畜牧兽医局提出并归口。

本标准起草单位：辽宁省动物疫病预防控制中心、辽宁省动物医学研究院。

本标准主要起草人：高志峰、张才、杨国丽、邓文超、张健、马建山、高原、兰德松。

II

DB21/T3054—2018

犬巴贝斯虫荧光定量PCR检测方法

1范围

本标准规定了犬巴贝斯虫的荧光定量PCR检测方法的技术要求，包含规范性引用文件、缩略语、原

理、仪器和器材、试剂和引物、样品的采集和前处理、操作步骤、检测过程中防治交叉污染的措施、废

弃物处理等。

本标准适用于在生物安全Ⅱ级（BSL-2）以上的实验室进行全血液样品中犬巴贝斯虫核酸的检测，

适用于犬巴贝斯虫病的确诊及流行病学调查。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求

中华人民共和国农业部公告2003年第302号《兽医实验室生物安全技术管理规范》

中华人民共和国农业部公告2017年第25号《病死及病害动物无害化处理技术规范》

3缩略语

该部分对本技术规范中用到的缩略语进行了注解：

DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid）

bp：碱基对（basepair）

PCR：聚合酶链式反应（polymerasechainreaction）

dNTP：脱氧核糖核苷三磷酸（Deoxy-ribonucleosidetriphosphate）

Taq酶：ExTaqDNA聚合酶（TaqDNApolymerase）

TAE：三羟甲基氨基甲烷-乙酸电泳缓冲液（Trisacetate-EDTAbuffer）

4原理

巴贝斯虫病是指由巴贝