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8.1.支原体参考学习资料.ppt

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sosoyjwNorthSichuanMedicalCollege川北医学院基法学院病原生物学教研室黄荣讲师敬业博爱求是创新医学微生物学·MedicalMicrobiology支原体(P191)Mycoplasma第八讲第一节概述第二节主要致病性支原体生物学性状所致疾病特殊检查方法(GIT、MIT、冷凝集)支原体与细菌L型的比较概述支原体(Mycoplasma)是一类缺乏细胞壁、呈高度多形性、能通过滤菌器、在无生命培养基中能生长繁殖的最小原核细胞型微生物。于1898年由Noccard首次分离出来,1967年将其正式命名为支原体。对人类致病的支原体主要有:支原体属肺炎支原体(mycoplasmapneumoniae)、人型支原体、生殖支原体、嗜精子支原体、穿透支原体、发酵支原体、梨支原体脲原体属解脲脲原体(Ureaplasmaurealyticum)、微小脲原体支原体(一)生物学性状:1.菌体形态排列:无细胞壁,高度多形性成分特点:细胞膜富含胆固醇,双股环状DNA,基因组G+Cmol%低,仅25%~40%。扫描电镜透射电镜支原体(一)生物学性状:1.菌体特殊结构:有荚膜或微荚膜、某些(如肺炎支原体、穿透支原体)具有顶端结构穿透支原体:1991年首次从1例艾滋病患者尿中分离出,其形态为杆状或长烧瓶状,一端为顶端结构。顶端结构能粘附于人红细胞、单核细胞、CD4+T淋巴细胞及人尿道上皮细胞,导致宿主细胞受损或死亡。目前认为穿透支原体可能是AIDS发病的一个辅助因素。穿透支原体穿透支原体附着红细胞支原体(一)生物学性状:1.菌体染色反应:G-(不易着色),Giemsa染色为淡紫色0.3~0.5μmGiemsa染色支原体(一)生物学性状:2.培养/菌落培养:营养要求较高:10%~20%人或动物血清以提供胆固醇与其他长链脂肪酸,多数还需要添加酵母浸液、组织浸液等pH适宜7.6-8.0,但解脲脲原体最适pH为5.5-6.5兼性厌氧,微氧环境(含5%CO2和90%N2)中生长最佳繁殖方式多样,生长缓慢支原体(一)生物学性状:2.培养/菌落菌落:固体培养基中2~7天长出直径约10~600μm的“油煎蛋样”小菌落支原体(一)生物学性状:2.培养/菌落菌落:低倍镜下观察菌落呈圆形,中心致密隆起深入琼脂,外周有颗粒包裹。支原体菌落(×100倍)Diense染色支原体(一)生物学性状:2.培养/菌落在液体培养基中增殖,分解底物使指示剂变色(分解葡萄糖产酸使酚红变黄),但培养基清亮。空白对照培养24h培养48h培养72h培养96h肺炎支原体培养结果代谢抑制试验检支原体(一)生物学性状:3.生化根据对葡萄糖、精氨酸、尿素的分解,可鉴别支原体。支原体葡萄糖精氨酸尿素PH吸附细胞肺炎支原体+--7.5红细胞生殖支原体+--7.5红细胞人型支原体-+-7.3-发酵支原体++-7.5-嗜精子支原体-+-7.0-穿透支原体++-7.5红细胞CD4+T细胞解脲脲原体--+6.0红细胞支原体(一)生物学性状:4.抗原主要有蛋白质和糖脂各型均有其特有抗原结构,交叉少,有鉴别意义常用方法:补体结合试验可检测糖脂类抗原ELISA试验可检测蛋白质类抗原血清抗体试验生长抑制试验(growthinhibitiontest,GIT)特异抗血清纸片周围形成抑菌圈代谢抑制试验(metabolicinhibitiontest,MIT)特异抗血清抑制支原体对葡萄糖的分解,酚红不变黄支原体(一)生物学性状:4.抗原生长抑制试验(growthinhibitiontest,GIT)特异抗血清纸片周围形成抑菌圈支原体(一)生物学性状:5.抵抗力对理化因素的抵抗力比细菌弱。对化学消毒剂敏感,但对结晶紫、醋酸铊和亚碲酸钾等有抵抗力。对影响细胞壁合成的抗生素如青霉素类天然耐受。对作用于细胞膜胆固醇(如皂素、毛地黄苷、两性霉素B等)、干扰蛋白质合成(如多西环素和交沙霉素等)、阻碍DNA复制(如左旋氧氟沙星和司帕沙星等)的药物均敏感。有的支原体在宿主体内易形成生物被膜,难以清除,并形成耐药。支原体(二)致病性:1.致病物质毒力因子生物学活性细胞表面结构黏附素如顶端蛋白助黏附荚膜或微荚膜抗吞噬毒性代

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