T_CVMA 216—2025 小反刍兽疫病毒双抗原夹心 ELI SA 抗体 检测方法.pdf

ICS11.220

CCSB41

团体标准

T/CVMA216—2025

小反刍兽疫病毒双抗原夹心ELISA抗体

检测方法

DoubleantigensandwichtELISAfordetectionofpestedespetits

ruminantsvirusantibody

2025-2-14发布2025-2-14实施

中国兽医协会发布

T/CVMA216—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国动物疫病预防控制中心提出。

本文件由中国兽医协会归口。

本文件起草单位：中国动物疫病预防控制中心、青海省动物疫病预防控制中心、山东省动物疫病预

防与控制中心、洛阳现代生物技术研究院有限公司、新疆维吾尔自治区动物疫病预防控制中心、甘肃省

动物疫病预防控制中心、西藏自治区动物疫病预防控制中心、河南科技大学、洛阳莱普生信息科技有限

公司。

本文件主要起草人：孙雨、才学鹏、宋晓晖、李玉婉、阚威、李静、宁立宏、胡冬梅、邱桂玉、王

睿男、林元清、马晓艳、游潇倩、都占林、孙生祯、魏梦君、郑思思、巨金铃、刘亚涛、李长印、曹丽

萍、央珍、党安坤、郭艺博、陈静、秦菊、薛文、苏晓慧、吴彬、马伟、席锐、艾日登才次克。

I

T/CVMA216—2025

小反刍兽疫病毒双抗原夹心ELISA抗体检测方法

1范围

本文件规定了小反刍兽疫病毒双抗原夹心ELISA抗体检测方法的技术原理、试剂与材料、仪器与设

备、操作步骤、试验成立条件和结果判定等内容。

本文件适用于检测羊血清中的小反刍兽疫病毒抗体。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

BSA：牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin）

HRP：辣根过氧化物酶（HorseradishPeroxidase）

PBS：磷酸盐缓冲液（PhosphateBufferedSaline）

TMB：四甲基联苯胺（TetramethylBenzidine）

5技术原理

采用双抗原夹心法的技术与原理，通过待测样本与包被板上的小反刍兽疫抗原的特异性抗体反应，

形成抗原-抗体复合物，再加入酶结合物（酶标小反刍兽疫抗原），则形成免疫复合物，通过显色液显

色酶标仪读取OD值。通过待测样品（S）/阳性对照（P）的比值，计算待测样品中PPRV抗体，S/P值与

PPRV抗体含量成正相关。

6试剂与耗材

6.1小反刍兽疫病毒pET-30a-(N)蛋白和pET-32a-(NH)蛋白制备，见附录A。

6.2酶结合物（HRP标记的小反刍兽疫病毒pET-32a-(NH)蛋白）。