DB41T 1376-2017 泡桐丛枝病植原体保存体系建立规范.docxVIP

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DB41

河南省地方标准

DB41/T1376—2017

泡桐丛枝病植原体保存体系建立规范

2017-04-24发布2017-07-24实施

河南省质量技术监督局发布

DB41/T1376—2017

I

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4泡桐丛枝病植原体培养 2

5泡桐丛枝病苗植原体鉴定 3

6泡桐丛枝病植原体保存 3

7档案管理 4

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II

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由河南省林业厅提出并归口。

本标准起草单位：河南农业大学、河南省林业科学研究院。

本标准主要起草人：范国强、翟晓巧、赵振利、邓敏捷、董焱鹏、曹喜兵、李永生。

本标准参加起草人：王燕军、张变莉、孙晓薇、马向阳、马永亮、赵利新、牛苏燕、刘玟杉、魏振峰、杨国强。

DB41/T1376—2017

1

泡桐丛枝病植原体保存体系建立规范

1范围

本标准规定了泡桐丛枝病植原体保存体系建立的术语和定义、泡桐丛枝病植原体培养、鉴定、保存和档案管理。

本标准适用于泡桐丛枝病植原体保存体系的建立。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

泡桐丛枝病

由于植原体侵染引起，造成泡桐的枝、叶、干、花、根部均表现畸形。隐芽大量萌发，侧枝丛

生，纤细，呈扫帚状。叶小，黄化，有时皱缩。花瓣变叶状，花柄或柱头生出小枝，花萼变薄，花

托多裂，花蕾变形，幼苗病后矮化。3.2

泡桐丛枝病植原体

引起泡桐发生丛枝病的一类无细胞壁的原核微生物，存在于病枝、叶韧皮部筛管中，可穿过筛板扩散和侵蚀细胞壁，在细胞内呈现球形、长杆形、椭圆形、梭形等多种形态，大小为200nm～820

nm。

3.3

植物组织培养

在无菌条件下，将离体的植物器官（如根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（如形成层、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞）或原生质体等，在配制的培养基上进行培养，在人工

控制适宜的光照和温度条件下，使之生长、分化并发育成完整植株的培养技术。

3.4

外植体

植物组织培养中作为离体培养材料的植物活体，包括完整植株、胚胎或从植物体上切取的器官、

组织等材料。3.5

植物激素

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2

是植物自身代谢产生的一类有机物质，并自产生部位移动到作用部位，在极低浓度下表现出显

著生理效应的微量物质，也被称为植物内源激素。

3.6

植物生长调节物质

人工合成的对植物的生长发育有调节作用的化学物质，与植物激素具有相似生理和生物学效应。

3.7

培养基

在植物组织培养过程中，由人工配制的提供培养材料生长所必需的营养元素和某些植物生长物

质的基质。组成成分有水、氮源、无机盐（包括微量元素）、碳源、植物生长调节物质等。

3.8

芽诱导

将培养材料在一定的诱导培养基中进行培养，培养材料分化出不定芽的过程。

3.9

生根培养

把不定芽转移到生根诱导培养基中诱导生根，形成完整植株的过程。

3.10

繁殖系数

一个培养周期内不定芽增殖倍数，即培养一个周期后增殖的不定芽数/接种时的不定芽数。

3.11

巢式PCR

一种变异的聚合酶链反应（PCR），通过两轮PCR反应，使用两套引物扩增特异性的DNA片断。第二对引物的功能是特异性的扩增位于首轮PCR产物内的一段DNA片断，巢式PCR的扩增具有很强的特异性。

4泡桐丛枝病植原体培养

4.1泡桐丛枝病无菌苗培养

取患有丛枝病泡桐的当年生幼嫩丛枝，用质量分数为0.1%的HgCl2消毒5min，再用无菌水清洗5次后接种于不含任何植物激素的PC基本培养基上，培养基中蔗糖浓度20g·L-1，琼脂浓度6g·L-1，培养温度25℃±2℃,光照强度130μmoL·m-2·s-1，光照时间16h·d-1。40d可获得2～3对叶片的泡桐丛枝病无菌苗。

4.2芽诱导

将4.1中获得的泡桐丛枝病无菌苗叶片剪成面积约0.5cm×1cm的小块外植体，分别接种在附加不同浓度0.1mg·L-1NAA～1.5mg·L-1NAA和3mg·L-16-BA～12m