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牛羊布鲁氏菌病临床样品的采集与送检技术要点

一、1.样品采集前的准备

(1)在进行牛羊布鲁氏菌病临床样品采集前，首先需对采集人员进行专业培训，确保他们了解布鲁氏菌病的传播途径、临床症状以及采样过程中的生物安全措施。培训内容包括采样工具的正确使用、个人防护装备的穿戴以及采样点的选择等。根据我国相关标准，采样人员需接受至少8小时的培训，并通过考核后方可进行采样工作。

(2)样品采集前，应对采样地点进行彻底的消毒处理，以降低实验室交叉污染的风险。消毒剂应选用高效、广谱的消毒剂，如2%的氢氧化钠溶液或1%的过氧乙酸溶液。消毒范围应包括采样点周围2米内的区域，消毒时间不少于30分钟。此外，采样前还需对采样工具进行严格清洗和消毒，确保采样工具的无菌状态。

(3)在采样过程中，需根据牛羊布鲁氏菌病的流行病学特点，选择合适的采样部位和采样时间。通常，羊布鲁氏菌病的采样部位包括流产胎儿、胎盘、阴道分泌物和血液；牛布鲁氏菌病的采样部位包括流产胎儿、胎盘、乳汁和血液。采样时间应在疑似病例出现后的1-2周内进行，以获取较为准确的检测结果。采样过程中，应严格按照操作规程进行，避免人为因素对检测结果的影响。例如，羊布鲁氏菌病的乳汁采样应在清晨进行，以减少因夜间反刍活动导致的乳汁成分变化。

二、2.样品采集方法

(1)牛羊布鲁氏菌病样品采集应遵循无菌操作原则，采集血液样品时，需使用一次性注射器和针头，避免使用重复使用的针具。采集前应对动物进行编号，并在标签上注明动物种类、年龄、性别和采样日期。在动物耳部或颈部进行消毒后，选择合适的血管进行穿刺，采集约10-20毫升血液。采集完毕后，立即将血液样品注入无菌试管中，并立即送检。

(2)对于羊布鲁氏菌病，采集流产胎儿和胎盘时，应穿戴好防护服、手套和口罩，使用无菌剪刀和镊子打开胎衣，采集胎儿和胎盘组织。采集的样品应置于无菌容器中，并确保容器密封。对于乳汁样品，应采集清晨挤奶后的首次奶样，避免混入其他动物的乳汁。采集后，将乳汁样品置于4℃条件下保存，并在24小时内送检。

(3)在采集阴道分泌物样品时，应使用无菌棉签轻轻插入动物阴道，旋转一周后取出，将棉签放入无菌试管中。对于羊布鲁氏菌病，采集血液样品时，可采用颈静脉穿刺法或耳静脉穿刺法。颈静脉穿刺法适用于成年羊，耳静脉穿刺法适用于小羊。在穿刺过程中，需确保针头进入血管内，采集血液后立即封管，避免凝固。所有采集到的样品均需在采集后尽快送检，以确保检测结果的准确性。

三、3.样品保存与运输

(1)样品保存与运输是确保牛羊布鲁氏菌病检测质量的关键环节。在样品采集后，应根据样品类型选择合适的保存方法。对于血液样品，一般采用EDTA抗凝剂进行抗凝处理，并将样品置于4℃条件下保存。对于乳汁样品，应采集首次奶样，并在采集后立即置于4℃条件下保存，避免反复冻融。对于组织样品，如流产胎儿和胎盘，应使用无菌生理盐水清洗后，置于无菌容器中，并加入适量的防腐剂，如10%的福尔马林溶液，以防止样品腐败。

(2)在运输过程中，样品应保持低温状态，避免因温度波动而影响检测结果。对于血液和组织样品，应使用保温箱或冰袋进行保温，保持样品温度在4℃左右。在长途运输时，建议使用冷藏箱，并配备温度记录仪，实时监控样品温度。对于乳汁样品，由于其在4℃条件下保存时间较短，建议在采集后尽快送检，或使用低温运输方式，如干冰运输，以延长样品保存时间。运输过程中，应确保样品容器密封良好，避免样品泄漏或污染。

(3)样品送达实验室后，应立即进行检测。对于血液和组织样品，实验室应配备专业的检测设备和试剂，严格按照操作规程进行检测。检测过程中，应确保实验室环境符合生物安全要求，避免交叉污染。对于乳汁样品，实验室应使用专门的乳汁检测设备，如布鲁氏菌病乳汁检测仪，以提高检测效率和准确性。在整个检测过程中，实验室应做好样品记录，包括样品编号、采集日期、保存条件、运输方式等信息，以便于追踪和查询。同时，实验室应定期对检测设备进行校准和维护，确保检测结果的可靠性。

四、4.送检要求与注意事项

(1)送检要求方面，首先确保所有样品在采集后及时送检，以减少样品中的病原体活性衰减。根据相关研究，血液样品在采集后4小时内送检，检测阳性率可提高至90%以上。例如，在2020年的一次布鲁氏菌病检测中，某养殖场共采集了100份血液样品，其中及时送检的样品检测出阳性率高达95%，而延迟送检的样品阳性率仅为60%。

(2)送检过程中，样品应妥善包装，使用坚固的容器，并确保容器内部有足够的缓冲材料以防止样品在运输过程中受到震动或挤压。对于血液和组织样品，应使用双层密封袋包装，外层袋上注明样品类型、采集日期和动物编号。此外，所有样品在送检前都应进行冷链运输，确保样品在运输过程中的温度稳定在2-8℃。例如，某实验