DB22T 1675-2012 蔬菜中单核细胞增生李斯特菌微生物分子分型 PFGE 法　　.pdfVIP

ICS07.100.30

C53

备案号：35808-2013DB22

吉林省地方标准

DB22/T1675—2012

蔬菜中单核细胞增生李斯特菌微生物分子

分型PFGE法

MolecularsubtypingofmonocytogenesListeriainvegetables——PFGE

2012-12-17发布2013-01-01实施

吉林省质量技术监督局发布

DB22/T1675—2012

前言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。

本标准由吉林出入境检验检疫局提出并归口。

本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心。

本标准主要起草人：刘韬、赵庆松、丁旭、吴连鹏、王宁、曲辉、史晓丽、刘金华、牛茜、罗雁非。

I

DB22/T1675—2012

蔬菜中单核细胞增生李斯特菌微生物分子分型PFGE法

1范围

本标准规定了蔬菜中单核细胞增生李斯特菌微生物分子分型的PFGE方法。

本标准适用于蔬菜中单核细胞增生李斯特氏菌生物分子分型。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修订单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

3缩略语

下列定义和缩略语适用于本文件。

PFGE：脉冲场凝胶电泳（PulsedFieldGelElectrophoresis）

Tris：三（羟甲基）氨基甲烷（tris(hydroxymethyl)aminomethane）

EDTA：乙二胺四乙酸（Ethylenediaminetetraaceticacid）

TEbuffer：Tris:EDTA缓冲液（Tris:EDTAbuffer）

SDS：十二烷基磺酸钠（Sodiumdodecylsulfate）

SKG：Seakem金琼脂（SeakemGold）

4试剂与材料

除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

4.1水：为符合GB/T6682的灭菌二级水。

4.2Half-Fraser培养基：见附录A.1。

4.3Fraser肉汤：见附录A.2。

4.4牛津琼脂（Oxford琼脂）：见附录A.3。

4.5ALOA琼脂：见附录A.4。

4.6胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE)：见附录A.5。

4.7胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂(TSA-YE)：见附录A.6。

4.8糖类利用肉汤（鼠李糖和木糖）：见附录A.7。

4.9动力试验琼脂：见附录A.8。

4.10CAMP（Christle，Atkins，Munch-Petersen）培养基及试验菌株：见附录A.9。

4.11蛋白酶K（ProteinaseK）储液见附录A.10。

4.12Tris:EDTA(TE)Buffer见附录A.11。

4.13十二烷基磺酸钠（SDS）。

4.14SeaKemGoldAgarose。

4.15限制性内切酶AscⅠ。