DB22T 1820-2013 粮食中串珠镰刀菌的PCR检测　.pdfVIP

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备案号：37939-2013DB22

吉林省地方标准

DB22/T1820—2013

粮食中串珠镰刀菌的PCR检测

PCRdetectionofFusariummoniliformingrains

2013-05-15发布2013-09-01实施

吉林省质量技术监督局发布

DB22/T1820—2013

前言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。

本标准由吉林省质量技术监督局提出并归口。

本标准主要起草单位：吉林省产品质量监督检验院、中华人民共和国吉林出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：史艳宇、魏春艳、刘金华、王莹、初真林、刘晓晖、周亮、王潇、张涛、王颖、

冷喜芳。

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DB22/T1820—2013

粮食中串珠镰刀菌的PCR检测

1范围

本标准规定了粮食中串珠镰刀菌的PCR检测方法。

本标准适用于粮食中串珠镰刀菌的快速筛选检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4789.15食品微生物学检验霉菌和酵母计数

GB/T4789.16食品卫生微生物学检验常见产毒霉菌的鉴定

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

WS/T230临床诊断中聚合酶链式反应（PCR）技术的应用

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

串珠镰刀菌Fusariummoniliform

串珠镰刀菌是一种重要的农作物病原真菌，能引起禾本科作物的根腐、茎腐和穗腐，是玉米青枯

病和穗腐病的主要病原真菌之一。

3.2

聚合酶链式反应polymerasechainreaction，PCR

模板DNA先经高温变性成为单链，在DNA聚合酶作用和适宜的反应条件下，根据模板序列设计的

两条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段互补序列发生退火而相互结合，接着在DNA聚合酶的作

用下以四种脱氧核糖核酸（dNTP)为底物，使退火引物得以延伸，然后不断重复变性、退火和延伸这一

循环，使位于两段已知序列之间的DNA片段呈几何倍数扩增。

4试剂和材料

除特别说明以外，所用试剂为分析纯或生化试剂。

4.1水：应符合GB/T6682中一级水的规格。

4.2马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基（Potatodextroseagar，PDA）：按GB4789.15规定。

4.3CTAB缓冲液：55mmol/LCTAB、1400mmol/L氯化钠、20mmol/LEDTA、100mmol/LTris，用

10%盐酸（HCl）调pH至8.0，121℃,20min高压灭菌，储存于2℃~8℃。

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DB22/T1820—2013

4.4TE缓冲液：10mmol/LTris、150mmol/L氯化钠、2mmol/LEDTA、1%十二烷基磺酸钠，用10%

盐酸（HCl）调pH至