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DB14/T711—2012

虹鳟三倍体制种技术规范

1范围

本标准规定了虹鳟三倍体制种的术语和定义、制种工艺和倍性检测。本标准适用于山西省境内虹鳟三倍体的制种。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T18654.14养殖鱼类种质检验第14部分：DNA含量的测定

SC/T1030.3虹鳟养殖技术规范人工繁殖技术SC1036虹鳟

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。3.1

三倍体Triploid

在自然作用或人为控制下，形成的具有3套染色体的生物个体。3.2

温度休克法Temperatureshockmethod

把适宜发育期的鱼类受精卵或胚胎在略高于（冷水鱼）或略低于（温水鱼）的亚致死温度下，处理一定时间，诱导产生多倍体的方法。

3.3

静水压休克法Hydrostaticpressureshockmethod

把适宜发育期的鱼类受精卵或胚胎放置于水压机中，施一定压力的静水压处理一定时间，诱导产生多倍体的方法。

4制种工艺

4.1温度休克诱导

4.1.1主要设备及要求

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4.1.1.1电热水箱：箱体由不锈钢或聚苯塑料制成，箱外壁设置有保温层。形状为长方形，尺寸为300cm×40cm×60cm，有效容积为500L～600L。箱内底部设有加热器，且全底均匀布置。

4.1.1.2温度控制器：用于控制电热水箱的水温并保持恒温。具有LED显示功能，其控温范围-10℃~50℃,精度小于0.5℃。设置温度传感器探头3个～4个，分别通过箱盖平均安装在电热水箱两宽边的中线上，探头在水面下5cm～20cm处。

4.1.1.3桶式孵化器：用于鱼类受精卵的孵化及温度休克处理，其构造见于SC/T1030.3。孵化器底部设有排水栓，1min～2min内可将水排干。

4.1.1.4注水龙头：有水箱注水龙头和孵化桶注水龙头之分，其中水箱注水龙头用于将孵化用水（水温8℃~10℃)注入电热水箱中，孵化桶注水龙头用于将孵化用水注入孵化桶中。注水流量为3L/min~

5L/min。

4.1.1.5虹吸管：用于将加热后的水从电热水箱虹吸入孵化桶中。用固定杆将虹吸管口固定在电热水箱底以上5cm处。每分钟供水3L。

4.1.1.6电磁式空气泵：无油设计，排气压力不小于0.3kg/cm2，排气量不小于0.05m3/min。

4.1.2亲鱼要求

4.1.2.1亲鱼为二倍体，其种质应符合SC1036的规定。体质应健壮、无病、无伤、无畸形。雌鱼宜在3龄以上，其卵子呈桔红色或橙黄色，卵粒圆而饱满，大小均匀；雄鱼宜在2龄以上。

4.1.2.2亲鱼培育水温低于13℃,放养密度小于3尾/m2，池水溶氧保持在7mg/L以上。

4.1.3精、卵采集与人工授精

精、卵采集及人工授精按照SC/T1030.3进行。将受精后的鱼卵立即置于桶式孵化器的8℃~10℃流水中，每桶可盛卵2万粒～3万粒，供水量为2L/min～3L/min。

4.1.4加温与控温

精、卵采集前，开启水箱注水龙头，向电热水箱中注水。当水位升至50cm高度时，停止注水，并接通加热器和温度控制器的电源，使箱内水温上升并保持在29℃。

4.1.5诱导方法

当孵化器中的受精卵发育累积温度达到（2±0.2）℃·h时，关掉孵化器注水龙头，停止向孵化器供水，并打开桶底排水栓，水全部放干后，立即用虹吸管从电热水箱向孵化器中注入29℃的水，1min~2min内注满后，注水量保持在3L/min～4L/min。10min后，停止注入水，并打开桶底排栓，1min～2min内将水排干后，再立即注入孵化用水（水温8℃~10℃),按SC/T1030.3规定进行常规孵化。鱼卵处理期间，应用电磁式空气泵进行充气，保证水中溶氧在6mg/L以上。

4.2静水压诱导

4.2.1设备要求

静水压力机主要包括手动加压杠杆、压力表及容卵钢筒。压力范围0kg/cm2～1000kg/cm2，容卵钢筒有效容积在500mL～1000mL之间。

4.2.2亲鱼要求

按4.1.2的要求执行。

4.2.3精、卵采集与人工授精

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按4.1.3的要求执行。

4.2.4诱导方法

当受精卵的胚胎发育有效积温达到（2±0.2）℃