血凝与血凝抑制.ppt

关于血凝与血凝抑制第1页，共41页，星期日，2025年，2月5日血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验一、实验目的二、实验内容三、实验原理四、实验材料五、实验方法与结果判定六、注意事项七、新城疫背景介绍第2页，共41页，星期日，2025年，2月5日一、实验目的1、掌握血凝和血凝抑制试验的基本原理、操作方法和结果判定方法2、了解新城疫有关背景知识第3页，共41页，星期日，2025年，2月5日二、实验内容1、血凝试验(HA)检测新城疫抗原2、血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体第4页，共41页，星期日，2025年，2月5日三、实验原理1、血凝试验（HA）原理：某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物地红细胞发生凝集，这种凝集红细胞的现象称为血凝（HA）,也称直接血凝反应。病毒颗粒红细胞第5页，共41页，星期日，2025年，2月5日2、血凝抑制试验（HI）原理：当病毒的悬液中加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时，则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。这时红细胞的凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑制（HI）反应，也称血凝抑制反应。Iamlate！抗体抗原第6页，共41页，星期日，2025年，2月5日四、实验材料1、血凝板（2人/块）2、新城疫阳性血清3、被检血清（1份）4、1％红细胞悬液5、稀释液6、移液器（50ul,2人/把）7、枪头第7页，共41页，星期日，2025年，2月5日五、实验方法与结果判定血凝试验（HA)1、在血凝板上第一排的1－12孔内各加入50ul生理盐水2、在第1孔内加入50ul病毒抗原，然后依次倍比稀释至第11孔，最后弃50ul3、每孔加入1％鸡红细胞悬液50ul4、轻轻振荡均匀，后放于室温或37℃中静置30分钟5、结果判定第8页，共41页，星期日，2025年，2月5日血凝效价测定第9页，共41页，星期日，2025年，2月5日结果判定标准1、＋＋＋＋：红细胞呈细沙样均匀铺于孔底，即100％凝集；2、＋＋＋：红细胞均匀铺于孔底，当边缘不整齐而稍向孔底集中，即75％凝集；3、＋＋：红细胞形成一个环状，四周有凝集块，即50％凝集；4、＋：红细胞于孔底形成圆团，边缘不够光滑，四周稍有凝集块，即25％凝集；5、－：红细胞于孔底形成圆团，边缘光滑整齐，即无凝集；第10页，共41页，星期日，2025年，2月5日第11页，共41页，星期日，2025年，2月5日血凝价的判定以出现＋＋（50％凝集）的抗原最高稀释倍数为该抗原的血凝价（1:128）。50ul1:256稀释的病毒抗原为该抗原的一个血凝单位。第12页，共41页，星期日，2025年，2月5日血凝抑制试验1、将病毒抗原稀释成4个血凝单位（1/128×4=1:32）2、在血凝板上1－12孔内各加入50ul生理盐水；3、在第1孔内加入被检血清50ul，然后倍比稀释至第11孔，最后弃50ul；4、第1－12孔内加入4单位抗原50ul（第12孔为病毒对照）；5、每孔加入1％鸡红细胞悬液50ul；6、轻轻振荡均匀，后放于室温或37℃中静置30分钟6、结果判定第13页，共41页，星期日，2025年，2月5日血凝抑制效价测定第14页，共41页，星期日，2025年，2月5日结果判定标准1、＋＋＋＋：红细胞呈细沙样均匀铺于孔底，即100％凝集；2、＋＋＋：红细胞均匀铺于孔底，当边缘不整齐而稍向孔底集中，即75％凝集；3、＋＋：红细胞形成一个环状，四周有下凝集块，即50％凝集；4、＋：红细胞于孔底形成圆团，边缘不够光滑，四周稍有凝集块，即25％凝集；5、－：红细胞于孔底形成圆团，边缘光滑整齐，即无凝集。第15页，共41页，星期日，2025年，2月5日血凝抑制价的判定以出现完全抑制凝集(即不凝集)的血清最高稀释倍数为该血清的血凝抑制价（1:4）。第16页，共41页，星期日，2025年，2月5日六、注意事项1、红细胞用前请摇匀2、用枪加样定要准，尽量不要有气泡3、结果判定有耐心4、HA和HI勿相混第17页，共41页，星期日，2025年，2月5日七、新城疫背景介绍第18页，共41页，星期日，2025年，2月5日鸡新城疫

（NewcastleDiseaseND）第19页，共41页，星期日，2025年，2月5日1、概述ND是由ND病毒（NewcastlediseaseVirus,NDV）引起的高度接触性和高度毁灭性的急性败血性传染病。1926年首先发生于印尼，同年发