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结果:一分子丙酮酸转变为一分子乙酰CoA,生成一分子NADH+H+,放出1分子CO2第23页,共58页,星期日,2025年,2月5日5.2.2.2三羧酸循环途径三羧酸循环包含8个(细分为10个)步骤:(1)乙酰辅酶A与草酰乙酸缩合形成柠檬酸柠檬酸合酶该反应不可逆,三羧酸循环的第一个限速酶。柠檬酸合酶(EC2.3.3.1)活性受ATP、NADH、琥珀酸CoA等抑制。第24页,共58页,星期日,2025年,2月5日(2)柠檬酸脱水生成顺乌头酸,然后加水生成异柠檬酸顺乌头酸酶顺乌头酸酶顺乌头酸酶实际上起异构化作用,反应平衡时,柠檬酸占90%,顺乌头酸占4%,异柠檬酸占6%,但由于在线粒体内,异柠檬酸不断向下反应,整个反应趋向于异柠檬酸的生成。第25页,共58页,星期日,2025年,2月5日(3)异柠檬酸氧化与脱羧生成α-酮戊二酸异柠檬酸脱氢酶异柠檬酸脱氢酶Mn2+异柠檬酸脱氢酶特性:1)具有脱氢和脱羧两种功能,脱羧反应需要Mn2+;2)是别构酶:ADP是激活剂;ATP和NADH是抑制剂。3)是限速酶此步反应为一分界点,之前为三羧酸转化,之后为二羧酸变化。经电子传递链被氧化生成3ATP。第26页,共58页,星期日,2025年,2月5日(4)α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅酶A
α-酮戊二酸脱氢酶系特性:1)包含三种酶(α-酮戊二酸脱羧酶、硫辛酸琥珀酰转移酶和二氢硫辛酸脱氢酶)和六种辅助因子(TPP、硫辛酸、CoASH、FAD、NAD+、Mg2+)。2)限速酶:受ATP、NADH和琥珀酰辅酶A的抑制。经电子传递链被氧化生成3ATP。α-酮戊二酸脱氢酶第27页,共58页,星期日,2025年,2月5日(5)琥珀酸的生成琥珀酰CoA合成酶Mg2+GTP+ADPGDP+ATP二磷酸核苷激酶Mg2+三羧酸循环中唯一生成ATP的反应(底物水平磷酸化)。第28页,共58页,星期日,2025年,2月5日(6)琥珀酸脱氢被氧化生成延胡索酸经电子传递链被氧化生成2ATP。琥珀酸脱氢酶第29页,共58页,星期日,2025年,2月5日(7)延胡索酸加水生成苹果酸延胡索酸酶第30页,共58页,星期日,2025年,2月5日(8)苹果酸被氧化生成草酰乙酸经电子传递链被氧化生成3ATP。苹果酸脱氢酶第31页,共58页,星期日,2025年,2月5日第32页,共58页,星期日,2025年,2月5日TAC小结 1)循环从C4物与乙酰CoA缩合生成C6物开始 2)每一次循环经历两次脱羧,放出2CO2 3)每一循环经历四次脱氢,其中3次以NAD+为氢受体,1次以FAD为氢受体; 4)每循环一次,底物水平磷酸化一次生成1GTP(ATP); 第33页,共58页,星期日,2025年,2月5日5)循环一次结束以C4物(草酰乙酸)重新生成为标志;6)总反应:7)三羧酸循环是不可逆的;8)三羧酸循环本身不会改变其中间产物的总量,但其它代谢会消耗其中间产物,需要及时补充。CH3COSCoA+3NAD++FAD+GDP+Pi+2H2O2CO2+CoASH+3NADH+3H++FADH2+GTP第34页,共58页,星期日,2025年,2月5日5.2.2.3草酰乙酸的回补反应丙酮酸的羧化支路是生物体内草酰乙酸回补的重要途径。第35页,共58页,星期日,2025年,2月5日5.2.2.4三羧酸循环能量计算及其意义三羧酸循环一次生成生成12个ATP。1mol的葡萄糖彻底氧化生成和CO2和H2O,可净生成36或38molATP。胞质内的NADH不能透过线粒体膜,需要经过α-磷酸甘油穿梭和苹果酸-天冬氨酸穿梭作用进入线粒体。第36页,共58页,星期日,2025年,2月5日-1-12×3/22×12×12×32×32×32×12×22×3NAD+NAD+NAD+NAD+FADNAD+Glu→6-磷酸葡萄糖6-磷酸果糖→1,6-磷酸果糖2×3-磷酸甘油醛→2×1,3-磷酸甘油酸2×1,3-磷酸甘油酸→2×3-磷酸甘油酸2×磷酸烯醇式丙酮酸→2×丙酮酸2×丙酮酸→2×乙酰CoA2×异柠檬酸→2×α-酮戊二酸2×α-酮戊二酸→2×琥珀酰CoA2×琥珀酰CoA→2×琥珀酸2×琥珀酸→2×延胡索酸2×苹果酸→2×草酰乙酸第一阶段糖酵解第二阶段第三阶段三羧酸循环ATP辅酶反应38/36第37页,共58页,星期日,2
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