《枸杞中6种链格孢霉毒素的测定 液相色谱-质谱法》 .pdf

枸杞中6种链格孢霉毒素的测定液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了枸杞中6种链格孢霉毒素（交链孢酚AOH、格孢毒素-IATX-I、链格孢酚单甲醚

AME、番茄交链孢菌毒素AAL、交链孢烯ALT、腾毒素TEN）的液相色谱-串联质谱检测方法。

本文件适用枸杞中6种链格孢霉毒素的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本

文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样用水复溶后经乙腈提取，分散固相萃取净化，液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。

5试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1乙腈：色谱纯。

5.1.2甲醇：色谱纯。

5.1.3甲酸：优级纯。

5.1.4乙酸铵：色谱纯。

5.1.5氯化钠：分析纯。

5.1.6N-丙基乙二胺（PSA）粉末：粒径50μm。

5.1.7十八烷基（C18）粉末：粒径50μm。

5.1.80.1%甲酸水溶液：取甲酸（5.1.3）1.0mL，用水定容到1000mL，摇匀。

5.1.90.1%甲酸乙腈溶液：取甲酸（5.1.3）1.0mL，用乙腈定容到1000mL，摇匀。

5.2标准品

6种链格孢霉毒素中文名称、英文缩写、CAS号和化学分子式见附录表A。

5.3标准溶液配制

1

5.3.1标准储备液（100.0μg/mL）：准确称取6种链格孢霉毒素标准品适量，分别用乙腈溶解并定

容，于-18℃避光贮存，有效期6个月。

5.3.2混合标准中间液（10.0μg/mL）：分别准确吸取6种链格孢霉毒素储备液各1.0mL于10mL

容量瓶中，用乙腈定容至刻度，于-18℃避光贮存，有效期1个月。

5.3.3混合标准工作液：分别准确吸取不同体积混合标准中间液，用空白枸杞基质配制成浓度为

1.0~300.0ng/mL的系列标准工作溶液，临用现配。

6仪器和设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源。

6.2天平：感量0.0001g和0.01g。

6.3高速粉碎机。

6.4涡旋混合器。

6.5超声波发生器。

6.6离心机：最大转速10000r/min。

6.7滤膜：0.22μm，有机相。

7分析步骤

7.2试液的制备

枸杞样品于2~8℃冷藏保存。试验时将枸杞样品取出，经高速粉碎机粉碎，分别置于样品袋中，

冷藏，备用。

7.2试液的提取

称取5.0g样品于（精确至0.01g）于50.0mL离心管中，加入5.0mL水，静置60min，加入

10.0mL乙腈（5.1.1）和5.0g氯化钠（5.1.5），涡旋5min，超声10min，8000r/min下离心3min。

吸取2.0mL上清液至装有80mgPSA（5.1.6）和50mgC18（5.1.7）的净化管内，涡旋2min，8000r/min

下离心3min，经0.22μm有机滤膜过滤，上机测定。

7.3仪器参考条件

7.3.1液相色谱参考条件

a）色谱柱：C18，2.1mm×100mm，粒径1.7μm或性能相当。

b）柱温：30℃。

c）流动相：A相为0.1%甲酸水溶液（5.1.8），B相为0.1%甲酸乙腈溶液（5.1.9），流动相梯度条

件见表1。

d）流速：0.3mL/min。

d）进样量：10μL。

2

表1流动相及梯度洗脱条件

时间/min流速/（mL/min）流动相A/%流动相B/%

0.000.3955

4.00