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(3)移位使核糖体相对于mRNA移动核糖体移位使mRNA在核糖体上移动3nt长度。移位使脱氨酰的tRNA进入E位,肽酰-tRNA进入P位,A位空出。杂合状态模型:--移位分两步进行:50S亚基相对于30S亚基移动,然后30S亚基移动使核糖体构象复原。移位必需的蛋白质因子EF-G,移位能量来自一分子GTP水解。核糖体沿mRNA的相对移动方向?5’—3’第86页,共123页,星期日,2025年,2月5日Thehybridstatetranslocationmodel第87页,共123页,星期日,2025年,2月5日tRNAmovesthrough3ribosomesites第88页,共123页,星期日,2025年,2月5日(4)不同延伸因子选择性结合到核糖体上使肽链不断延伸▲易位需要EF-G,其结构类似于氨酰-tRNA*EF-TU*GTP复合体,该因子为细胞的主要组分,一个核糖体就约有1个分子。▲EF-Tu及EF-G与核糖体的结合是相互排斥的。▲易位需要GTP水解,这引起EF-G的变化,继而又引起核糖体结构的变化。第89页,共123页,星期日,2025年,2月5日EFfactorshavealternatinginteractionsBindingoffactorsEF-TuandEF-Galternatesasribosomesacceptnewaminoacyl-tRNA,formpeptidebonds,andtranslocate.黄色霉素抑制释放梭链孢酸抑制释放核糖体沿mRNA移动与肽酰-tRNA移位这两个过程是偶联的。第90页,共123页,星期日,2025年,2月5日原核生物延伸因子原核生物肽链延伸每次反应共需要3个延伸因子,EF-Tu,EF-Ts,EF-G。3个延伸因子都具有GTP酶活性。EF-Tu,EF-Ts-促进AA-tRNA进入A位。EF-G-促进移位和去氨酰-tRNA的释放。第91页,共123页,星期日,2025年,2月5日真核生物延伸因子(P136)EF-1(对应于EF-Tu,EF-Ts)-促进AA-tRNA进入A位。EF-2(对应于EF-G)-促进移位和去氨酰-tRNA的释放。消耗2个GTP向生长中的肽链加上一个氨基酸。原核生物每向肽链上加上一个氨基酸消耗??个GTP。第92页,共123页,星期日,2025年,2月5日5.2.3蛋白质合成的三个阶段简介Initiation:30SsubunitonmRNAbindingsiteisjoinedby50Ssubunitandaminoacyl-tRNAbindsElongation:RibosomemovesalongmRNA,extendingproteinbytransferfrompeptidyl-tRNAtoaminoacyl-tRNATermination:PolypeptidechainisreleasedfromtRNA,andribosomedissociatesfrommRNA4.2蛋白质合成的三个阶段简介4.2.3肽链的终止4.2.2肽链的延伸4.2.1肽链的起始第93页,共123页,星期日,2025年,2月5日4.2.3肽链的终止三种终止密码子释放因子肽链的终止反应过程第94页,共123页,星期日,2025年,2月5日(1)三种终止密码子三个终止密码子(terminationcodon,stopcodon)UAA、UAG和UGA终止蛋白质合成;UAA是最常用的终止密码子。UGA比UAG使用频率高一点,但UGA出错的可能性更大一点。第95页,共123页,星期日,2025年,2月5日4.1氨基酸活化4.1.1氨酰-tRNA合成酶4.1.2氨基酸的活化第54页,共123页,星期日,2025年,2月5日4.1.1氨酰-tRNA合成酶总反应:aminoacyl-tRNAsynthetaseAA+tRNA+ATP→AA-tRNA+AMP+PPi实际反应:?第一步:AA+ATP+E→E-AA-AMP+PPi?第二步:E-AA-AMP+tRNA→AA-tRNA+E+AMPAA:aminoacid;AA-tRNA:aminoacyl-tRNAE:aminoacyl-tRNAsynthetase第55页,共123页,星期日,2025年,2
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