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第2章细胞工程
第2节动物细胞工程
Part2动物细胞融合技术与单克隆抗体
人教版高中生物选择性必修三;
20世纪70年代以后
基因工程、细胞工程等发展,人胰岛素和干扰素大量生产。
19701980;
单克隆抗体及其应用;
植物细胞融合
植物体细胞杂交;
温故而知新;
1、概念:使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
2、原理:细胞膜具有一定的流动性
物理法:电融合法与植物原生质体融
3、诱导方式化学法:聚乙二醇(PEG)合的方法相同
生物法:灭活病毒诱导法——动物细胞融合特有;
两同NA细胞
灭活的病毒
融合
()
有丝分裂
两个完整的
杂交细胞;
灭活:指用物理或化学手段使病毒失去感染能力(不感染细胞),但是并不破坏病毒的抗原结构(诱导细胞融合)。
细胞工程8;
6、意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。
7、应用:
①至今,种间、属间、科间,甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功。
②研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
③为制造单克隆抗体开辟了新途径。;
项目;
1)每个B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体
2)体内产生的特异性抗体种类多达百万种以上;
1、传统抗体制备方法及缺陷
1抗原.注射动物体内
1B淋巴细胞浆细胞一1抗体
(不能无限增殖)
缺陷:产量低、纯度低,特异性差。;
一种B淋巴细胞
(只分泌一种特异性抗体)
骨髓瘤细胞
(能无限增殖);
单克隆抗体
细胞工程15;
2、单克隆抗体的制备过程
从患骨髓瘤的小鼠体内取
骨髓瘤细胞的培养
骨髓瘤细胞
诱导融合
16;
123
杂交瘤细胞(多种)
细胞工程;
抗体检测(抗原-抗体杂交技术)
能分泌所需抗体
的杂交瘤细胞
18;
体内或体外培养
体外培养
《亻人
单克隆抗体
19;
项目;
抗原蛋白
融合
B淋巴细胞
筛选杂交细胞
克隆能产生抗体
的阳性细胞
再克隆
注射小鼠阳性细胞
单克隆抗体;
①细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能皮氨基喋呤阻断。
②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但不能分裂增殖。
③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,但能不断分裂增殖。;
将杂交瘤细胞群稀释,约每孔1个细胞进行培养(克隆化培养)
一段时间后,检测各孔上清液中细胞分泌的抗体
上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔
分泌抗体能跟特定抗原结合的细胞即为所需杂交瘤细胞;
在妊娠第8天就可以作出诊断,
比原来诊断方法提前了10d左右,
准确率在90%以上。
诊断优点:
具有准确、高效、简易、快速特点
25;
新冠病毒检测试剂
i
艾滋病检测试剂-26;
02单克隆抗体及其应用
2、运载药物
单克隆抗体+药物=“生物导弹”主要用于癌症治疗。
优点:位置准确、疗效高、副作用小;
02单克隆抗体及其应用
2、运载药物单克隆抗体+同位素(荧光标记)
在特定组织中成像的技术,可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。;
练习与应用
一、概念检测
1.下列有关动物细胞融合与植物体细胞杂交比较的叙述,错误的是()
A.它们的原理都涉及细胞膜的流动性
B.都可以用电融合法或PEG融合法诱导融合
C.融合前都需用纤维素酶或果胶酶处理细胞
D.前者主要是为了获得细胞产品,后者主要是为了获得杂种植株
2.科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原,制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是(A)
A.利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒
B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体
C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合,经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
D.
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