食品微生物学检验.ppt

四、思考题为什么平板计数琼脂培养基在使用前要保持温度在45℃左右？如何保持？在进行菌落总数测定时，为什么培养皿倒置培养？培养温度为什么选择36℃？根据菌落总数的原始记录报告测定结果。说明在进行菌落总数测定时应特别注意的问题第31页，共74页，星期日，2025年，2月5日食品中大肠菌群的测定

GB4789.3—2010一、实验目的1.学习食品中大肠菌群的测定方法。2.了解大肠菌群检验的卫生学意义第32页，共74页，星期日，2025年，2月5日二、概述概念：在一定培养条件下能发酵乳糖产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。意义：食品被粪便污染的指标菌；食品被致病菌污染的可能第33页，共74页，星期日，2025年，2月5日三、（第一法MPN计数法）（1）检样稀释（2）初发酵（LST）试验--36±1℃培养48h（3）复发酵（BGLB）验证--36±1℃培养48h（4）报告第34页，共74页，星期日，2025年，2月5日LST肉汤管或BGLB管是否产气？第35页，共74页，星期日，2025年，2月5日LST肉汤管或BGLB管是否产气？第36页，共74页，星期日，2025年，2月5日大肠菌群测定第二法——平板计数法第37页，共74页，星期日，2025年，2月5日四、思考题初发酵（LST）试验后，产气的管怎么做初发酵（LST）试验后，没有产气的管能否报告为未检出大肠菌群第38页，共74页，星期日，2025年，2月5日某学生在对糕点中大肠菌群检验时，实验结果的原始记录（采用稀释度为1g，0.1g，0.01g）：发酵管编号：12345～9初发酵试验：＋＋＋＋－复发酵试验：＋＋－－根据上述试验结果，查表，说明大肠菌群的最可能数。第39页，共74页，星期日，2025年，2月5日食品中沙门氏菌的检验沙门氏菌——最重要的病原菌属，根据生化特性分为6个亚属。检查食品中沙门氏菌的卫生学意义沙门氏菌可引起人类伤寒、副伤寒和食物中毒---在世界各地的食物中毒中常占首位或第二位第40页，共74页，星期日，2025年，2月5日沙门氏菌检验程序GB4789.4-2010为什么要前增菌？前增菌时间不能长？为什么要用2种增菌液？第41页，共74页，星期日，2025年，2月5日平板分离——为什么用2种选择性鉴别培养基沙门氏菌在BS上的可疑菌落特征第42页，共74页，星期日，2025年，2月5日在HE培养基上的典型菌落第43页，共74页，星期日，2025年，2月5日沙门氏菌TSI的特征第44页，共74页，星期日，2025年，2月5日如何提高沙门氏菌的检出率？对样品进行前增菌，使受损的沙门氏菌恢复活力选择性增菌使用两种选择性分离增菌液，一种是抑制除沙门氏菌以外其它肠道菌的生长，一种是在不影响其他肠道菌生长的情况下促进沙门氏菌的生长。为了最大可能的检出沙门氏菌，原则上必须使用两种以上选择性分离培养基接TSI时，应尽可能多挑几个可疑菌落第45页，共74页，星期日，2025年，2月5日C-BSI-BS第46页，共74页，星期日，2025年，2月5日C-HEI-HE第47页，共74页，星期日，2025年，2月5日生化试验在接种TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时增加一项营养琼脂（NA），经TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的选择后，可筛掉大部分非沙门氏菌株，大大减少了工作量同时直接接种蛋白胨水(供做靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、KCN培养基的内容。本部分还增加了对疑似菌落进行留样确认的部分，以备必要时复查血清学鉴定（选择做）——将含有已知抗体的诊断血清与待检菌悬液各一滴要玻片上混合，数分钟后，如出现颗粒状或絮状凝集，即为阳性反应。此法简便快速，适用于新分得的细菌的鉴定或分型。第48页，共74页，星期日，2025年，2月5日报告综合以上生化试验和血清学鉴定的结果,报告25g样品中检出或未检出沙门氏菌第49页，共74页，星期日，2025年，2月5日食品中志贺氏菌的检验GB4789.5-2003志贺氏菌检验的卫生学意义志贺氏菌检验的基本步骤：增菌、平板分离、生化试验、血清学分