食品理化检验兽药残留.ppt

（二）测定方法测定方法高效液相色谱法（HPLC法）：最常用气相色谱法（GC)TLC（薄层色谱法）ELISA（酶联免疫法）分光光度法第29页，共59页，星期日，2025年，2月5日HPLC法测定磺胺类药物残留1、原理动物性食品样品经过预处理后，用流动相溶解，所得样液用HPLC-紫外检测器检测。与标准比较，用保留时间定性、标准曲线法定量。第30页，共59页，星期日，2025年，2月5日2、样品的预处理提取净化浓缩提取：磺胺类药物不易溶于非极性溶剂，而在极性较大的溶剂中溶解性较好，一般常用乙腈等提取；净化：在乙腈提取的上清液中，加入适量正己烷振荡除去样品中的脂溶性杂质，离心，弃去正己烷；下层液体加入正丙醇适量，于50℃下减压干燥，加一定量95%乙腈溶解残留物，并过过氧化铝B小柱净化；用95%乙腈洗脱杂质，再用适量70%乙腈洗脱，收集洗脱液；浓缩：在洗脱液中加入适量正丙醇，50℃下减压干燥，然后再准确加入一定量的流动相溶解，得到样品处理液。第31页，共59页，星期日，2025年，2月5日3、色谱条件色谱柱：ODS-C18(4.6mm×250mm)柱；检测器：紫外检测器；波长：270nm；进样量：20μL；柱温：35℃；流动相：乙腈+甲醇+水+乙酸=2:2:9:0.2；流速：1.0ml/min第32页，共59页，星期日，2025年，2月5日4、标准曲线的绘制准确称取各磺胺类兽药对照品于容量瓶中，以甲醇定容作为标准储备液，吸取各标准贮备液，以甲醇稀释至质量浓度为0-2.0mg/L的标准系列，各取20μL进样分析，根据峰面积与相应的质量浓度进行线性回归，绘制标准曲线。第33页，共59页，星期日，2025年，2月5日5、样品的测定将处理好的待测样品，在3所述的色谱条件下，用HPLC-紫外检测器检测，与标准比较，用保留时间定性、标准曲线法定量。第34页，共59页，星期日，2025年，2月5日硝基呋喃类兽药残留的测定（一）概述（二）测定方法（掌握）第35页，共59页，星期日，2025年，2月5日一、概述硝基呋喃类药物包括：呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因等。国际法典委员会、中国和欧美等大多数国家禁止使用此类药物，在动物性食品和饲料中不得检出：硝基呋喃类药物和代谢物能使实验动物发生癌变和基因突变。第36页，共59页，星期日，2025年，2月5日测定方法高效液相色谱法（HPLC法）：最常用ELISA（酶联免疫法）：快速筛选检验LC-MS法（液质连用）第37页，共59页，星期日，2025年，2月5日一、原理动物性食品样品经过预处理后，用流动相溶解，过氧化铝小柱后供HPLC检测。与标准比较，用保留时间定性、标准曲线法定量。HPLC法测定畜禽肉中呋喃唑酮残留第38页，共59页，星期日，2025年，2月5日①称取适量畜禽肉样品，按1：1.5的比例加入C18，混匀后装入玻璃层析柱中；②用正己烷淋洗，去除脂肪；③再用乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液，在55~60℃下减压干燥浓缩至干；④加少量流动相溶解残渣，过氧化铝小柱净化，洗脱液供HPLC测定。二、样品的预处理第39页，共59页，星期日，2025年，2月5日（1）色谱条件色谱柱：ODS-C18柱(250mm×4.6cm,5μm)；检测器：紫外检测器；波长：367nm；流动相：乙腈+0.015mol/LH3PO4=2:8流速：0.7~1.0ml/min（2）样品测定用流动相稀释标准系列，经氧化铝小柱净化，分别测定标准和样品净化液，绘制标准曲线，根据标准曲线定量。三、样品的测定第40页，共59页，星期日，2025年，2月5日四、方法说明①本法适用于鸡的肌肉、肝、肾组织和鱼肉组织中呋喃唑酮残留检测；②呋喃唑酮的检出限和回收率：鸡的肌肉组织10μg/kg；加标回收率为80%~110%，鱼肉组织25μg/kg，70%~120%。③C18的去垢效应和巨大的表面积，浓缩了传统的样品前处理中所需的样品匀化、组织细胞裂解、提取、净化等过程，避免了样品在上述处理中待测物的损失。第41页，共59页，星期日，2025年，2月5日盐酸克伦特罗残留的检验（一）概述（二）测定方法（掌握）第42页，共59页，星期日，2025年，2月5日第1页，共59页，星期日，2025年，2月5日（一）兽药和兽药残留的概念【掌握】典型的兽药：是指用于预防和治疗畜禽疾病的药物。但是，随