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第3章基因工程;课标要点;知识导图;课前·新知导学;1.目的基因
用于改变受体细胞性状或获得______________等的基因,它可以编码__________。
2.筛选目的基因的依据
根据目的基因的已知____________进行筛选是较为有效的方法。;3.利用PCR技术获取和扩增目的基因
(1)原理:______________复制。
(2)条件:一定的缓冲液、DNA、分别与两条模板链结合的__________、4种脱氧核苷酸、________________________、温度控制。;(3)过程:;(4)结果:由于延伸后得到的产物又可以作为下一个循环的模板,因而每一次循环后目的基因的量可以增加一倍,即成________形式扩增(约为2n,其中n为扩增循环的次数)。
(5)产物鉴定:________________。
4.目的基因也可以通过构建_________获得;
PCR过程需要解旋酶吗?所需要的DNA聚合酶又具有什么特点呢?
【答案】PCR过程中,DNA双链解开是在高温下完成的,不需要解旋酶。所需要的DNA聚合酶应具有耐高温的特点。; 下列属于PCR技术的条件的是 ()
①单链的脱氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥DNA聚合酶⑦限制性内切核酸酶
A.①②③⑤ B.①②③⑥
C.①②③⑤⑦ D.①②④⑤⑦
【答案】B;
【解析】PCR技术需要一对引物,即一对单链的脱氧核苷酸序列引物,①正确;PCR技术需要模板,即目的基因所在的DNA片段,②正确;需要脱氧核苷酸作为原料,③正确;核糖核苷酸是合成RNA的原料,而PCR合成的是DNA,④错误;采用PCR合成DNA时,不需要DNA连接酶,而需要DNA聚合酶,⑤错误,⑥正确;体外合成DNA时,不需要限制性内切核酸酶,⑦错误。故B符合题意。;1.基因表达载体的功能
使目的基因在受体细胞中______________,并且可以遗传给下一代,使目的基因能够________和发挥作用。
;2.表达载体的组成
目的基因、________、________、标记基因等。
(1)启动子:位于基因的__________的一段有特殊序列结构的DNA片段,是____________识别和结合的部位,能驱动基因________产生所需的mRNA。
(2)终止子:位于基因的________的一段有特殊序列结构的DNA片段,终止________。;3.基因表达载体的构建过程
(1)用一定的______________切割载体,使它出现一个切口。
(2)用__________或能产生相同末端的限制酶切割含__________的DNA片段。
(3)利用________________将目的基因片段拼接到载体的切口处,形成重组DNA分子。;
构建重组质粒时只能用同一种限制酶切割目的基因和载体吗?
【答案】切割目的基因和载体并非只能用同一种限制酶,如果两种不同的限制酶切割后形成的黏性末端相同,在DNA连接酶的作用下目的基因和载体也可以连接起来。; 下列选项中不是基因表达载体必要的组成成分的是
()
A.目的基因 B.启动子
C.终止子 D.抗青霉素基因
【答案】D
【解析】基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子等,A、B、C不符合题意;抗青霉素基因可以作为标记基因,但标记基因也可以是其他的基因,所以抗青霉素基因不是基因表达载体所必需的,D符合题意。;1.转化的概念
目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内__________________的过程。;2.转化的方法;受体细胞;
植物基因工程的受体细胞是体细胞还是受精卵?为什么?
【答案】体细胞和受精卵都可以,因为植物细胞的体细胞和受精卵都具有全能性,都可以发育成完整个体。; 农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞,目的基因的最终位置是 ()
A.Ti质粒上 B.受体细胞染色体上
C.裸露细胞核中 D.存在细胞质中
【答案】B
【解析】农杆菌的Ti质粒上的T—DNA片段具有转移作用,能整合到细胞染色体DNA上。将目的基因插入T-DNA片段中,能利用T-DNA片段的特性,将目的基因转移到受体细胞的染色体DNA上。;目的基因的检测与鉴定;
检测棉花中导入的抗虫基因是否表达的最简单的方法是什么?
【答案】用叶片直接饲喂棉铃虫,观察棉铃虫是否死亡。; 目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是 ()
①检测受体细胞是否含有目的基因
②检测受体细胞是否含有致病基因
③检测目的基因是否转录出mRNA
④检测目的基因是否翻译出蛋白质
A.①②③ B.②③④
C.①③④ D.①②④;
【答案】C
【
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