《病原生物与免疫学实验》实验二沉淀反应.pptx

免疫实验二

沉淀反应;沉淀反应（precipitation）;形成肉眼可见的大的免疫复合物。;免疫浊度测定絮状沉淀试验;一、凝胶内沉淀试验;原理：可溶性抗原与相应抗体在凝胶中向四周扩散，形成浓度梯度，在抗原抗体相遇并且浓度比例适当的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。

;;材料：;方法：

1.制备2%琼脂凝胶：用天平称量5.1g琼脂粉溶于600ml蒸馏水中，在电磁炉上加热煮沸，随后加入

NaN34-6滴，搅拌均匀备用。

2.制板：将载玻片置于水平台上，将50℃左右融化的琼脂倾注于洁净的载玻片上，形成厚度2mm凝胶板。;3.打孔：将梅花形打孔模板置于凝胶板下，用打孔器打孔，孔径3mm,孔距4mm，孔要求光滑圆整

无裂痕。

4.加样：每孔加入10ul

5.扩散：将已加样的凝胶板放于湿盒内，置37℃温箱温浴24h,观察结果

;2.抗原或抗体的存在与

否以及相对含量的估计;3.抗原性质的分析;;4.抗体效价的滴定;应用

1.AFP检测的最早方法

2.血清中含量较高的酶类、细菌病毒感染后血清中产生的抗体的检测

;原理：抗体混于琼脂中与待测的抗原,在两者比例合适的部位结合形成沉淀环。环的大小与抗原的浓度成正相关。;技术要点;;;

T1为16-24h；T2为24-48h；T3为48h以上,可见T3为直线，T1为反抛物线;待检蛋白质抗原须具备的条件;应用;二、液体内沉淀试验;方法：

1.先将抗血清加入内径1.5-2mm小试管中，约装1/3高度。

2.再用细长滴管沿管壁将抗原溶液缓缓

叠加在抗体层上，加入液体量高为1-1.5cm，使两者形成明显界面。

3.将试管置于室温下3-5分钟观察结果。;结果