动物细胞制药课件.pptxVIP

動物細胞制藥;;;;;;;;;;;;血清的品質標準

???血清品質高低取決於兩方面因素：一是取材對象，二是取材過程。?

??理化性質

滲透壓、pH值、蛋白電泳圖譜、蛋白含量、激素水準、內毒素等。

蛋白含量包括血清總蛋白含量（不低於35-45g/L）、球蛋白含量（應

小於20g/L)、血紅蛋白含量等。其中球蛋白含量是一項非常重要的指

標，血清中球蛋白主要是抗體，球蛋白含量越低血清品質越高。血紅

蛋白也是越低越好。;血清的品質標準

微生物檢測

包括細菌、真菌、支原體、病毒等。特別是對支原體、病毒的檢測

支原體是一種很小的微生物，可通過孔徑22mm的濾膜。支原體、

病毒污染在光學顯微鏡下難於察覺，細胞也能生長繁殖，但會影響

實驗結果。

檢測支原體的方法很多，如培養法、PCR法、螢光染色法、電鏡觀

察法等。;血清的品質標準

促生長效果這是血清重要的特性之一，應以培養的細胞來檢測

克隆形成率懸浮生長的細胞，有限稀釋法，統計克隆生長百分比

貼瓶率測定貼壁細胞，集落數占接種細胞數的百分比

續傳代培養細胞培養七天收集細胞，計數，取平均值。連續測試

三個週期以上，觀察細胞生長狀況。;血清的外觀

好的血清應該是透明清亮，土黃色或棕黃色，無沉澱或極少沉澱，比較

粘稠。

如血清渾濁、不透明、含許多沉澱物，說明血清污染或血清中的蛋白質

變性。

若血清呈棕紅色，說明血清中的血紅蛋白含量太高，取材時有溶血現象

搖晃時感覺液體稀薄，說明血清中摻入的生理鹽水太多。;血清的使用與儲存

使用前處理

滅活處理，即56℃30分鐘。滅活的目的使去除血清中的補體成分。??

儲存條件

血清一般儲存在-20℃，同時應避免反復凍融。購買大包裝的血清後

首先要滅活處理，然後分裝成小包裝，儲存於-20℃，使用前融化。

融化時最好現置於4℃。融化後的血清在4℃不宜??時間存放，應盡

快使用。

???使用濃度

自從有了合成培養基，血清就是作為一種添加成分與合成培養基混合

使用，使用濃度一般為5～20％，最常用是10％。;;;三、合成培養基;;;;;;;;;;;;;;;;;五、環境和消毒;;;;;;;;;;;;;;可用於細胞培養的消毒滅菌方法很多，但每種方法都有一定的適應範圍。

如常用的過濾除菌系統、紫外照射、電子殺菌燈、乳酸、甲醛薰蒸等手段消毒實驗室空氣；

多用新潔而滅消毒實驗室地面；

常用幹熱、濕熱消毒劑浸泡、紫外照射等方法消毒培養用器皿；

採用高壓蒸汽滅菌或過濾除菌方法消毒培養液。;;;;;;;;;;;;;;;;;;