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第三節轉基因技術(Transgenictechnology)1轉基因與轉基因動物轉基因超級鼠1982年,英國的《自然》雜誌發表了一篇文章:有兩個美國實驗小組利用轉基因技術,將大鼠生長激素重組基因導入到小鼠受精卵中,培育出具快速生長效應的“轉基因超級鼠”。轉基因鼠比與它同胎所生的小鼠生長速度快2~3倍,體積大一倍。概念轉基因:1)將人工分離和修飾過的基因導入到生物體基因組中,由於導入基因的表達,引起生物體的性狀的可遺傳的修飾,稱之為轉基因技術。2)轉基因技術就是指利用分子生物學技術,將某些生物的基因轉移到其他物種中,改造生物的遺傳物質,使遺傳物質得到改造的生物在性狀、營養和消費品質等方面向人類需要的目標轉變。轉基因動物:所謂轉基因動物就是指以實驗方法將外源基因導入動物染色體基因組內穩定整合並能遺傳給後代的一類動物。轉基因的方法
1、顯微注射法:將DNA注射到胚胎的細胞核內,再把注射過DNA的胚胎移植到動物體內,使之發育成正常的幼仔。
2、體細胞核移植方法:先在體外培養的體細胞中進行基因導入並篩選。然後將帶轉基因體細胞移植到去掉細胞核的卵細胞中,生產重構胚胎。3.逆轉錄病毒感染法:最早用來得到轉基因小鼠的方法,利用逆轉錄載體將遺傳資訊以RNA分子的形式,在逆轉錄整合酶和逆轉錄基因組末端的特異性核酸序列的作用下,反轉錄並整合到宿主基因組中去,最終得到轉基因小鼠。4.胚胎幹細胞法:將轉染的胚胎幹細胞注射入受體囊胚腔,可參與嵌合體的形成,將來出生的動物的生殖系統就有可能整合上外源基因,通過雜交繁育得到純合目的基因的個體,即為轉基因動物。轉基因的方法轉基因動物的應用前景
1、研究基因的結構與功能,瞭解動物生命現象的內在本質。2、建立多種疾病的動物模型,研究發病機理及治療方法。3、改善動物生產性能,提高動物育種效率。4、作為醫用或食用蛋白的生物反應器。可以通過家畜乳腺分泌大量安全、高效、廉價的人體藥用蛋白。四個主要國家轉基因作物種植面積占全球99%。美國占66%,達3900萬公頃,轉基因作物產量也居世界第一,美國種植的75%的大豆、34%的棉花和71%的玉米都是轉基因作物。阿根廷占23%,達1350萬公頃。加拿大占6%,達350萬公頃。中國第四位,占4%,達210萬公頃。歐盟國家總面積不到20萬公頃,0.3%左右。四個轉基因作物種植大國2002年數據存在問題
1、食品安全問題:1)未知的可能副作用?2)外源基因在人體內表達?2、技術問題:1)成本;2)成功率;3)基因組的有效整合、穩定遺傳;什麼是生物反應器?生物反應器是指利用轉基因活體動物的某種能夠高效表達外源蛋白的器官或組織來進行工業化生產活性功能蛋白的技術,這些蛋白一般是藥用蛋白或營養保健蛋白。用於表達的生物反應器包括動物血液、泌尿系統、精囊腺、乳腺等,還包括禽蛋和昆蟲(例如家蠶)個體等。其中動物乳腺生物反應器是目前國際上唯一證明可以達到商業化生產水準的生物反應器。據預測,2010年世界上動物乳腺生物反應器的年產值將達到500億美元以上。生物反應器的種類及應用動物基因工程(AnimalGeneticEngineering)動物基因工程,原稱遺傳工程,是應用DNA重組技術,按照人們的意願,在基因水準上改變生物遺傳性,創造新生物物種,通過工程化為人類提供有用產品及服務的技術;或指應用現代化的生物科學和遺傳學技術,對動物基因進行操縱或改造的科學工程。基因工程的核心技術是DNA的重組技術,還包括基因的表達技術,基因的突變技術,基因的導入技術等。什麼是動物基因工程?基因工程一般分為4個步驟:一是取得符合人們要求的DNA片段,這種DNA片段被稱為“目的基因”;二是將目的基因與質粒或病毒DNA連接成重組DNA;三是把重組DNA引人某種細胞;四是把目的基因能表達的受體細胞挑選出來。基因工程的基本操作第一節目的基因獲取1基因組DNA及總RNA的提取動物DNA的來源(核DNA、線粒體DNA、質粒DNA)1.血液、毛髮、皮屑(口腔上皮細胞)、精液、化石及耳朵等活體組織;2.固定和包埋的組織標本:脫蠟、蛋白酶K消化RNA來源:新鮮組織或細胞DNA提取方法:常規苯酚-氯仿方法、試劑盒方法---;RNA提取:所用器皿和試劑必需經高溫滅菌或DEPC處理GenomeDNATotalRNA2基因文庫基因文庫(Genelibrary)包括cDNA文庫(cDNAlibrary)和基因組文庫(Genomeli
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