植物的快繁与脱毒培养.pptVIP

：①变色。由于营养物质被病毒利用，或病毒造成维管束坏死阻碍了营养物质的运输，叶片的叶绿素形成受阻或积聚，从而产生花叶、斑点、环斑、脉带和黄化等。花朵的花青素也可因而改变,使花色变成绿色或杂色等,常见的症状为深绿与浅绿相间的花叶症如烟草花叶病。②坏死。由于植物对病毒的过敏性反应等可导致细胞或组织死亡，变成枯黄至褐色，有时出现凹陷。在叶片上常呈现坏死斑、坏死环和脉坏死，在茎、果实和根的表面常出现坏死条等。③畸形。由于植物正常的新陈代谢受干扰，体内生长素和其他激素的生成和植株正常的生长发育发生变化，可导致器官变形，如茎间缩短，植株矮化，生长点异常分化形成丛枝或丛簇，叶片的局部细胞变形出现疱斑、卷曲、蕨叶及带化等。

黄瓜病毒病由黄瓜花叶病毒（CMV）引起，辣椒病毒病由CMV和TMV引起一串红病毒病病原是黄瓜花叶病毒（CMV）、烟草花叶病毒（TMV）、一串红病毒1号（Salviavirus1）、甜菜曲顶病毒和蚕豆萎蔫病毒。黄瓜花叶病毒寄主范围很广，可以由多种蚜虫传播。Soybeanmosaicvirus简称SMV，称大豆花叶病毒，属马铃薯Y病毒组，病毒的危害给农业生产带来重大的损失,如草莓病毒的危害,曾使日本草莓产量严重降低,品质大大退化,使生产几乎受到灭顶之灾.柑橘的衰退病曾经毁灭了巴西的大部分柑橘,花卉病毒的危害，表现在球极、宿根等花卉的严重退化，致使花小而少，甚至畸形、变色，观赏价值大大下降。图1CherryleafrollvirusPrunusnecroticringspotvirus，SYMPTOMS:Weakterminalgrowth;delayedfruitdevelopment;poorleafcolorandsize图2PlumPoxVirus（洋李痘疱病毒）causedBlossomBreak图3图4FlatAppleDiseasecausedbyCRLV（CherryRaspLeafVirus，樱桃锉叶病毒）1．热处理法的发现及应用热处理又称温治疗法(theomtherapy)，原理是当植物组织处于高于正常温度的环境中时，组织内部的病毒受热之后部分或全部钝化，在高温下，不能生成或生成病毒很少，而破坏却日趋严重，以致病毒含量不断降低，这样持续一段时间，病毒自行消灭，从而达到脱毒的目的。(1)温汤浸渍处理适用于休眠器官、剪下的接穗或种植的材料，在50℃左右的温水中浸渍10min至数小时，方法简便易行，但易使材料受伤。(2)热空气处理热空气处理对活跃生长的茎尖效果较好，将生长的盆栽植株移入温热治疗室(箱)内，一般在35—40℃。处理时间因植物而异，短则几十分钟，长可达数月。热处理方法主要缺陷是并非能脱除所有病毒，因此热处理需与其他方法配合应用，才可获得良好的效果。在进行脱毒培养时，由于微小的茎尖组织很难靠肉眼操作，因而需用带有适当光源的简单解剖镜(8—40倍)。除了在进行植物组织无菌培养一般工具外，还需要一套解剖刀。剥离茎尖时，应尽快接种，茎尖暴露的时间应当越短越好，以防茎尖变干。在切取外植体之前一般须对茎芽进行表面消毒。叶片包被严紧的芽，如菊花、兰花，只须在75%酒精中浸蘸一下，而叶片包被松散的芽，则要用0.1%次氯酸钠表面消毒10min。如苹果：茎原基0.05-0.08mm茎原基带2片叶原基0.1-0.2mm茎原基带4片叶原基0.3-0.4mm茎原基带4片叶原基0.6-0.8mm将接种好的茎尖置于22℃左右的温度下。每天以16h2000—3000lux的光照条件下培养。由于在低温和短日照下，茎尖有可能进入休眠；所以较高的温度和充足的日照时间必须保证。微茎尖需数月培养才能成功。一般以White、Morel和MS培养基作为基本培养基，尤其是提高钾盐和铵盐的含量会有利于茎尖的生长。在茎尖培养中，由于操作方便，一般都使用琼脂培养基。（一）直观鉴定：直接观察植株茎叶有无某种病毒引起的可见症状。（四）电子显微镜(elecmcmicroscope)检查法由于人的眼睛难以观察小于0.1mm的微粒，而借助于普通光学显微镜也只能看到小至200μm的微粒，所以只有通过电子显微镜才能分辨0.5μm大小的病毒颗粒。这样采用电子显微镜既可以直接观察病毒，检查出有无病毒存在，了解病毒颗粒的大小、形状和结构，又可以鉴定病毒的种类。这是一种较为先进的方法，但需一定的设备和技术。这一方法的优点是灵敏度高和能在植物