2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体课件-高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体

一、动物细胞融合

1.什么是动物细胞融合？2.动物细胞融合的原理是什么？3.诱导动物细胞融合的方法有哪些？4.动物细胞融合的结果及意义？5.动物细胞融合技术有哪些应用？新知自学(P52页）

1、概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2、原理：细胞膜的流动性3、诱导方式物理法：离心法、电融合法化学法：聚乙二醇（PEG)融合法生物法：灭活病毒诱导法一、动物细胞融合技术特有

灭活病毒诱导法灭活：指用物理或化学手段使病毒失去感染能力（不感染细胞），但是并不破坏病毒的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。完成的标志

1、概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。4、结果：形成杂交细胞，具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。仍能进行有丝分裂。2、原理：细胞膜的流动性3、诱导方式物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活的病毒一、动物细胞融合技术动物细胞融合动物细胞培养特有

正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞一、动物细胞融合技术5．意义：细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。6．应用(1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。(2)用于制造单克隆抗体。生产单克隆抗体

植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志主要用途意义细胞膜的流动性、植物细胞的全能性细胞膜的流动性用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法离心法、电融合法、PEG融合法、灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合获得完整的杂种植株主要用于制造单克隆抗体打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能小结：动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较

二、单克隆抗体

抗体的传统生产方法：123412341234抗原动物体内多种浆细胞多种抗体从血清中分离抗体该法制备抗体的缺陷：产量低，纯度低，特异性差，灵敏度低如何解决这个问题呢？如果利用单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆）形成的一个细胞群，这样的细胞群就有可能产生的化学性质单一、特异性强的抗体，即单克隆抗体。

1975年英国科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒的实验一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖杂交细胞动物细胞培养技术设计方案：动物细胞融合技术单克隆抗体既能无限增殖，又能产生足够数量的特定抗体二、单克隆抗体制备

(53-54页）为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，二次筛选?大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法?注射抗原的目的是什么？诱导其融合的方法有哪些？两两融合后培养液中有几种细胞?怎样筛选出杂交瘤细胞？讨论：获得相应的B淋巴细胞物理法、化学法、生物法B-B、瘤-瘤、B-瘤（未融合B、瘤）用选择培养基筛选筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞体内培养、体外培养

二、单克隆抗体的制备单克隆抗体第二次筛选杂交细胞杂交瘤细胞体外或体内培养第一次筛选骨髓瘤细胞诱导融合分泌特异抗体的杂交瘤细胞杂交瘤细胞群提取已免疫的B淋巴细胞动物细胞融合技术动物细胞培养技术小结：既能大量繁殖又能产生抗体优点：特异性强、灵敏度高、可大量制备注射抗原单克隆抗体制备的过程中，应用到的技术手段单克隆抗体制备过程的原理细胞膜的流动性和细胞增殖

（1）作为诊断试剂——最广泛的应用抗人绒毛促性腺激素单克隆抗体比原来诊断方法提前了10d左右，准确率在90﹪以上。艾滋病检测试剂单克隆抗体的应用：

乙肝抗体检测试剂盒★新冠病毒抗体检测试剂盒单克隆抗体的应用：

（2）用于治疗疾病和运载药物单克隆抗体应用资料2使用高效的细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞。但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害，这限制了它在临床上的应用。抗体一药物偶联物（antibody-drugconjugate,ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如下图所示。抗体药物接头细胞凋亡ADC被细胞吞噬单克隆抗体的应用：

单克隆抗体主要用于癌症治疗，也有少量用于其他疾病的治疗。单抗药物剂型种类繁多，有单独使用的，也有与同位素、毒素、药物结合使用的。生物导弹=单克隆抗体+药物(或放射同位素或细胞毒素)瞄准装置爆炸装置优点：位置准确、疗效高、