第三章血型与输血检验临床检验教研室60讲解.ppt

大医精诚自强不息大医精诚自强不息第三章血型与输血检验临床检验教研室*第三节白细胞抗原系统WBC血型抗原（1）RBC血型抗原：ABH、K、Lea（2）WBC特有的抗原，如中性粒细胞上的NA、NB、NC等（3）与其他组织共有的抗原,也是最重要的WBC血型抗原，即人类白细胞抗原（HLA）*一、人类白细胞抗原与抗体1.人类白细胞抗原（HLA抗原）是糖蛋白抗原，是两条肽链组成的异质二聚体；又称组织相容性抗原、移植抗原、组织抗原。定位在6号染色体短壁上，HLA基因分类，分别编码：HLA-I类抗原：HLA-A、HLA-B、HLA-CHLA-II类抗原：HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP*①HLA-I类抗原：分布广泛，存在于几乎所有有核细胞膜上,以淋巴细胞上密度最高，成熟RBC上无，血浆中也有相当量的HLA-I类抗原。②HLA-II类抗原：分布范围较窄，作为一种分化抗原在细胞上表达，大多数骨髓分化细胞具有HLA-II类抗原，主要表达在B淋巴细胞、激活的T淋巴细胞和血管内皮细胞等细胞膜的表面。*（1）HLA抗原分布（2）HLA抗原作用HLA-I类抗原：与免疫排斥反应有关，是组织排斥反应的主要抗原HLA-II类抗原：参与免疫应答和免疫调节*（3）HLA抗体1.HLA抗体大部分是IgG,少数是IgM。2.产生途径：①临床上主要通过输血、妊娠、同种器官移植等免疫作用产生，其中母—胎产生的抗体最常见。②使用纯化的HLA免疫动物产生HLA异种抗体，③使用杂交瘤技术制备单克隆抗体；3.HLA抗体的分类*（4）HLA分型方法1.淋巴细胞毒试验（LCT）：HLA分型常用方法原理：淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后，在补体的协同作用下，引起细胞膜的损伤，增加膜通透性，表现为细胞溶解破裂，加染料（伊红Y）进入细胞着色，细胞肿胀、折光性下降，镜下观察着色细胞百分数，比例高于20%为阳性反应。I类抗原分型时，用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞；II类抗原分型时，用B淋巴细胞。*2.混合淋巴细胞培养试验（MLC）：检测HLA-D将两个不同遗传型个体的等量淋巴细胞在一起体外培养3-5d，两者细胞表面抗原暴露，如果两者HLA-DR及HLA-DQ抗原相同，体外培养的淋巴细胞无反应；如果两者抗原不完全相同，双方不同的组织相容性抗原能刺激对方，引起淋巴细胞转化，DNA合成量增多，形成淋巴母细胞。淋巴细胞的转化率与两者之间组织相容性抗原的差异大小成正比。无淋巴细胞的转化增殖表明二者相容，可作为器官移植时选择供体细胞的依据。*3.分子生物学技术：以PCR为基础基因分型；国内常用以测序为基础的基因分型：直接、可靠，但最昂贵繁琐。如：PCR-SSOP:特异性寡核苷酸探针聚合酶链式反应PCR-SSP:序列特异性引物聚合酶链式反应*（5）HLA的应用1)器官移植：HLA抗原与同种器官移植的排异反应密切相关，2）输血：在成分输血时使用HLA同型血液能提高疗效及防止输血反应。3）亲子鉴定：红细胞血型和HLA抗原等都可作为一种遗传标记用于亲子鉴定，特别是HLA系统具有高度的多态性，在亲子鉴定中是一个非常有用的工具。4）疾病的诊断：一些疾病与HLA有关*大医精诚自强不息大医精诚自强不息