免疫系统与疾病PPT课件 免疫学诊断技术.pptx

第二十八章

免疫学诊断技术;第一节体外抗原抗体反应的特点及影响因素;抗原抗体反应的原理及特点；凝集反应、沉淀反应与免疫标记技术的原理及应用。;第一节;一、高度特异性

二、表面化学基团之间的可逆结合

三、适当条件下的可见性;一、凝集反应（agglutinationreaction）

1.直接凝集反应

2.间接凝集反应;单向琼脂扩散示意图;间接法ELISA示意图;2.酶免疫组化技术

在细胞、亚细胞水平检测组织细胞中Ag和Ab。

3.BAS-ELISA

BAS放大系统与ELISA结合提高了检测的灵敏度。

;ELISPOT检测示意图;间接荧光法示意图;（三）放射免疫测定法（radioimmunoassay，RIA）

敏感性高、重复性好、可自动化检测，但该技术需要特殊的放射性检测设备，且有一定的放射性污染。;（四）发光免疫分析（luminescenceimmunoassay，LIA）

该技术具有高灵敏度和可自动化分析等优点，常用于血清超微量活性物质的测定，如甲状腺素的检测。;胶体金法检测尿液中的hCG;（六）免疫印迹技术

（七）蛋白质芯片技术

该技术可实现快速、准确、高通量地分析抗体或抗原，现已应用于细胞、细菌表达谱研究、微生物感染的检测、肿瘤抗原初筛等方面。

;第三节;一、免疫细胞的分离

1.外周血单个核细胞的分离

2.淋巴细胞及其亚群的分离

（1）尼龙棉柱法富集T细胞

（2）免疫吸附分离

（3）免疫磁珠法

（4）流式细胞术分选;二、免疫细胞功能的测定

1.T细胞功能测定

（1）形态计数法

（2）3H-TdR掺入法

（3）MTT比色法

（4）迟发性超敏反应（DTH）试验;第二节;溶血空斑试验;51Cr释放法;4.吞噬功能检测

通常选择颗粒性抗原，被中性粒细胞或单核巨噬细胞吞噬，根据吞噬百分率和吞噬指数反映吞噬细胞的吞噬能力。是检测固有免疫功能常用实验。;5.细胞因子检测

（1）生物活性检测法：测细胞因子活性，灵敏性高，特异性低。

（2）免疫学检测法：测细胞因子含量，临床常用的方法。

（3）分子生物学检测法：从基因水平测定待检细胞产生某种细胞因子的水平。;第四节;一、分子影像技术的概念

分子影像技术（molecularimaging）是运用影像学手段显示组织水平、细胞和亚细胞水平的特定分子，反映活体状???下分子水平变化，对其生物学行为在影像方面进行定性和定量研究的一门学科。

研究内容包括如下几方面：①高灵敏度、高特异性疾病标志物分子诊断方法研究；②用于早期疾病检测的分子影像探针研究；③分子影像指导下的疾病治疗研究；④基于纳米材料的诊断治疗一体化探针研究。;二、分子影像成像基本条件

1.分子探针构建

2.生物信号放大

3.分子成像

敏感、快速、高分辨的成像技术。;三、分子影像技术的优势

1.直观

可以将复杂的分子生物学信息转换成直观的图像呈现。

2.动态

可以在同一活体中连续多次观察生物学事件的发生、发展过程。

3.包含空间信息

利用图像融合技术，可以同时定位生物学事件的解剖位置和范围。;四、免疫学中常用的分子影像技术

1.光声成像技术

2.荧光成像技术

3.放射性核素成像;原抗体反应有高度特异性；是表面化学基团之间的可逆结合；适当条件下的可见性等特点。体外试验包括凝集反应；沉淀反应；免疫标记技术。细胞功能的检测首先进行免疫细胞的分离，包括外周血单个核细胞的分离；淋巴细胞及其亚群的分离。免疫细胞功能的测定包括T细胞功能测定；B细胞功能测定；细胞毒试验；吞噬功能检测；细胞因子检测。分子影像技术主要包括光声成像技术；荧光成像技术；放射性核素成像。;谢谢观看