无菌工艺验证-培养基灌封试验.ppt

混悬剂/半固体制剂对培养基灌封的要求*需要模拟搅拌或循环流动的过程。如果有无菌添加过程，也应进行模拟。需要将液体培养基增稠到适当粘度。可选用琼脂或羧甲基纤维素作为增稠剂，也可选用其它试剂，但要证明其没有抑制细菌或真菌的作用。在培养结束后，需将培养基从塑料或金属管中挤出检查其混浊度和真菌菌落，也可进行无菌检查实验。如果选择显色培养基遇到污染物变色的方法，则需要对其进行验证。悬浮剂半固体制剂*主题5：培养基灌装验证设计、执行与文件编制制订培养基灌封实验方案的考虑因素（一）*生产线最长运行时间及其造成的相关风险01干预的次数、类型和复杂程度02是否有冻干工序03设备的无菌装配04总人数和所从事的操作05无菌加入和无菌转移的次数06班次更换、暂停和必要的更衣07无菌设备的拆卸与连接08环境监测09制订培养基灌封实验方案的考虑因素（二）*生产线的配置和运行速度产品重量检查容器/密封系统与无菌操作相关的各种特殊规定总人数和所从事的操作总的原则综合考虑生产线可能造成污染的各种因素尽可能模拟实际生产的无菌操作可能时，应包括最差条件的模拟测试验证开始前的准备工作*设备确认通风系统（HVAC）的确认设备的在线清洗和灭菌CIP,SIP灭（除）菌工艺验证湿热、干热灭菌工艺除菌过滤空气过滤器的完好性检测容器/胶塞密封完好性测试人员培训洁净室环境达到设计要求培养基灌封实验方案的内容举例*定义被模拟的工艺定义使用的房间，灌封线和设备使用的容器和密封件的类型灌装线的速度灌封数量模拟过程中的干扰和中断的数目和类型参与的人员数目使用的培养基灌封到容器内培养基的体积选择的最差条件及其原理培养条件，培养温度，培养时间所进行的环境监测批记录复印件职责说明所有工作的合格标准列举最终报告中需要的文件本次模拟的持续时间方案的执行与记录（一）*培养基灌封的日期和时间1使用的房间和设备2容器胶塞的型号和尺寸3培养基种类和灭菌方式4每容器中的灌装体积5灌装速度6灌封的瓶数，灯检丢弃的瓶数和原因7培养的瓶数，阳性的数量8培养时间和温度9方案的执行与记录（二）*培养基灵敏度检查的结果有无阳性结果。如有，要给出微生物鉴定的结果。参与培养基灌封的人员如发生异常情况，需给出调查报告。环境监测的数据培养基灌封实验中的环境监测*环境监测－按照相应的规程进行，包括：空气粒子数沉降碟浮游菌表面监测人员监测对无菌生产区环境的评估培养基灌封实验中的灵敏度检查实验*培养基灵敏度检查实验：使用完成14天培养的灌封前期培养基样品用枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠球菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉和环境菌作为阳性菌将每个菌种准备含100cfu/0.1ml的菌液，每个菌种接种2支培养基样品，同时并平板计数（双份）对真菌在20-25?C下培养，对细菌在30-35?C下培养，每天检查，5天内需有生长迹象再验证与增补性验证的要求*1对每条生产线，每年进行两次再验证，间隔时间为5-7个月。人员至少每年参加一次再验证，以进行资格再确认。每条生产线轮流使用最大和最小规格的容器，变换生产线的速度。再验证2根据风险程度决定培养基灌封实验的批数。通常为1-3批。增补性验证培养基灌封实验的总结报告*最终报告中应包括以下内容模拟的最差条件事件清单环境监测结果微生物鉴别结果培养基的营养检查实验结果培养条件、结果读取日、结果读取人、每位参与者的灌装瓶数等信息。结论（结果是否可以接受）合格证书工艺验证/再验证合格证书人员资格确认证书培养基灌封实验阳性结果的调查(一)*调查的范围应包括环境微生物监测数据，空气悬浮粒子监测数据CIP设备，清洁、消毒程序的执行情况培养基、设备和零件的灭菌工艺，灭菌釜的校正情况高效过滤器检测(空气悬浮粒子水平，过滤器检漏，风速测量，密封系统检查，使用年限等)除菌过滤器完好性房间气流型式与压差人员操作技术培训情况培养基灌封实验阳性结果的调查(二)*调查的范围还应包括以往产品无菌检查实验结果人员卫生状况监测数据培养基灌装实验中的干预方式分析该区域近期是否有过维修活动，生产线的改造情况该生产线培养基灌封实验历史数据已灭菌物品的储存条件培养基灌封过程中的异常事件阳性污染菌与环境监测污染菌的鉴别无菌生产系统**消毒剂灭菌设备清洗设备蒸汽灭菌干热灭菌水预处理纯蒸汽发生器高风险操作区域混合灌装其他VHP,EO发生器冻干机最终灭菌压缩空气