核酸类药物及其生产工艺.pptVIP

21核酸类药物生产方法主要有提取法和发酵法。发酵法主要用于生产单核苷酸。提取法生产DNA和RNA的主要技术是，先提取核酸和蛋白质复合物，再解离核酸与蛋白质，然后分离RNA与DNA。3一、核酸类药物的分离纯化一般方法01RNA与DNA的提取与制备核苷酸的制备核苷的制备02核酸类物质的分离提取及其发酵生产1发酵法制备RNA2酶法制备脱氧核苷酸酶法制备5’单核苷酸双酶法生产肌苷酸和鸟苷酸产氨短杆菌嘌呤核苷酸生物合成调节机制5受GMPATP的反馈抑制1被G阻遏2受GMP反馈抑制3被A阻遏4受ATPADPAMPGMP反馈抑制6受GTP的反馈抑制注：PRPP——5－磷酸核糖焦磷酸型菌株IMP发酵机制产氨短杆菌腺嘌呤缺陷肌苷酸诱变图谱肌苷酸产生诱变过程的产量变化选用产氨短杆菌腺嘌呤缺陷型菌株以解除腺嘌呤衍生物对的反馈抑制；01提供亚适量A培养基通过补救途径合成微生物生命活动所需要的DNA，不足以产生反馈抑制的腺嘌呤衍生物；02培养基中加入特异抑制IMP脱氢酶的化学物质（如8－氮杂鸟嘌呤）则IMP被切断，GMP不能生成，解除GMP的反馈抑制，使IMP进一步被积累；03提高IMP产量的因素Mn2+在限量的情况下培养后期产氨短杆菌细胞膜容易透过细胞膜，并且嘌呤核苷酸补救合成所需的酶和中间体核糖－5－磷酸很容易透过，在细胞外重新合成大量的肌苷酸；因工业原料和工业水都含较高的Mn2＋，通过诱变育种的方法选育了对Mn2+不敏感的变异株，使发酵液Mn2＋含量高达1000?g/ml时，肌苷酸的生物合成仍不受影响。3、核苷生产工艺流程01叠氮胸苷02阿糖腺苷03三氮核苷04阿糖胞苷05聚肌胞苷酸06胞二磷胆碱二、核酸类药物生产叠氮胸苷－是美国FAD批准的治疗艾滋病的新药；系核苷酸的类似物，取代正常腺嘧啶核苷酸参与病毒的合成但不能继续复制，从而达到阻止病毒增值的目的。68％的病人临床表现为减轻症状、延长寿命的显著疗效；副作用为贫血、白细胞减少，但有32％的患者服用后引起股骨头坏死、破坏人的造血功能。（Azidothymidine,AZT）