第三章血型与输血检验临床检验教研室73讲解.ppt

（一）Rh血型鉴定方法：1.人源盐水介质法2.酶介质法3.抗人球蛋白试验4.微柱凝胶血型卡法*1.人源盐水介质抗D试验：【原理】用二硫苏糖醇处理人源的IgG抗D血清，可使IgG“转变”成类似大分子的IgM型抗体，可与RBC上的D抗原结合发生凝集。【操作】Rh抗D血清（IgM）1d+5%受检者RBC1d,混匀。1000r/min,离心1min,观察结果。结果观察凝集：Rh（D）阳性不凝集：Rh（D）阴性*2.酶介质法【原理】Rh抗体绝大多数属于免疫性抗体（IgG），与相应RBC抗原结合后，在盐水介质中不出现肉眼可见的凝集。木瓜酶、菠萝酶可以破坏RBC表面的唾液酸，降低RBC表面负电荷，使RBC彼此靠拢；同时酶还可以部分的改变RBC表面结构，使一些隐蔽抗原得以暴露，在特异性不完全抗体作用下，与相应RBC发生凝集。*酶介质一期法（直接酶介质法）将0.5%蛋白水解酶直接加于Rh抗血清和RBC生理盐水中，37℃水浴30min，离心观察凝集反应。特点：简便、迅速，但敏感性稍差（因孵育过程中，酶可降低Ig在内的血清蛋白，降低了实验的敏感性）适用于：Rh血型鉴定及交叉配血试验酶介质二期法（间接酶介质法）先用酶液将RBC置37℃水浴处理10min，用生理盐水洗涤RBC3次，配成2-5%RBC悬液。然后加入抗血清，37℃水浴30min，离心观察凝集反应。特点：敏感度较一期法高，但操作较复杂，适用于：鉴定抗原及检查血清中的抗体。*3.抗人球蛋白试验—Coombs试验*+抗原不完全抗体抗人球蛋白（完全抗体）直接抗人球蛋白试验间接抗人球蛋白试验4.Rh血型鉴定的临床意义①?Rh血型与输血②Rh血型与妊娠③协助治疗*四、红细胞血型交叉配血试验交叉配血试验：主侧试验：受血者血清（PS）+供血者RBC（DC）检查受血者血清中有无能破坏供血者RBC的抗体；副侧试验：受血者RBC（PC）+供血者血清（DS）检查输入的血浆有无破坏受血者RBC的抗体；自身对照：受血者RBC（PC）+受血者血清（PS）借以显示直接抗人球蛋白试验（+）和RBC缗钱状凝集的存在。*交叉配血实验*红细胞（DC）血清(PS)血清（DS）红细胞(PC)供血者受血者（主测）（次测）①发现受血者与献血者之间有无不相合的抗原抗体成分，避免同种抗体导致的输血后溶血反应。②发现不规则血型抗体；③发现ABO血型以外的配血不合；④防止因错误定型所致的输血事故，是安全输血的根本保证。*交叉配血的目的完整的交叉配血试验程序至少应包括：①?查询受血者既往血型检查记录；②?对受血者血样作ABO正反定型及Rh血型鉴定，必要时做其它血型抗体鉴定；③选择预先已进行血型检查的合格供血者血样作交叉配试验。*（二）交叉配血实验方法及评价1）盐水介质配血法2）酶介质配血法3）抗人球蛋白配血法4）聚凝胺配血法5）凝胶微柱配血法*（二）交叉配血实验方法及评价成批量配血，可使用自动化仪器（如中心血站），医院输血科或血库仍用手工法。1.检查IgM血型抗体的交叉配血实验：常用盐水配血试验优点：简单，反应迅速，如有不配合问题，可立即显示出来，使用方便。缺点：仅用于检查ABO血型系统的IgM抗体是否相配，不能检查不相配的IgG血型抗体，若要检测不完全抗体，须采用其他方法。*2.检查IgG血型抗体的交叉配血试验（1）酶介质配血法（2）抗人球蛋白配血法（3）凝聚胺配血法（4）微柱凝胶配血法*（三）交叉配血的临床意义安全输血的重要保障为确保输血安全，应输同型血。3.若受血者一次大量输血（超过1600-2000ml）,除了作受血者与供血者之间的交叉配血外，还应作供血者之间的交叉配血，以防止供血者相互间血型不合及不完全抗体的存在，保证输血安全。*大医精诚自强不息第三章血型与输血检验临床检验教研室*血型鉴定和交叉配血一、标本的采集、送检与保存（一）标本的采集1.红细胞悬液标本：末梢血或EDTA抗凝血洗涤后盐水稀释2%RBC悬液：滴定抗体效价；5%RBC悬液：血型鉴定、交叉配血；10%RBC悬液：测定抗体亲和力。2.血清或血浆：分离血清