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ICS67.120
B45
备案号:44981-2015DB22
吉林省地方标准
DB22/T2260—2015
鹿鞭鉴定方法PCR法
IdentificationofSikaDeerandWapitiPizzlesPolymeraseChainReactionMethod
2015-02-01发布2015-03-01实施
吉林省质量技术监督局发布
DB22/T2260—2015
前言
本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。
本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。
本标准起草单位:中国农业科学院特产研究所。
本标准主要起草人:邢秀梅、吴琼、杨福合、苏伟林、邵元臣、查代明、荣敏、刘华淼、徐佳萍、
杨颖、涂剑锋、张铁涛。
I
DB22/T2260—2015
鹿鞭鉴定方法PCR法
1范围
本标准规定了梅花鹿鞭、马鹿鞭(塔河马鹿除外)的PCR鉴定方法。
本标准适用于梅花鹿鞭、马鹿鞭(塔河马鹿除外)的真伪鉴定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
WS/T230-2002临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
鹿鞭pizzle
梅花鹿、马鹿的外生殖器,包括阴茎及睾丸。
4原理
针对梅花鹿、马鹿线粒体DNA(mtDNA)的D-loop区特异性基因序列设计引物,应用聚合酶链反应(PCR)
技术扩增特异性DNA片段,根据是否扩增出特异性片段对鹿鞭进行鉴定。
5试剂和材料
除非另有说明,所有的化学试剂均为分析纯。实验用水规格应符合GB/T6882中二级水的规定。
5.1引物
上游引物:5’-CAAAGCACGTGATATAACCTTATG-3’
下游引物:5’-ATCTAGTGCTCGAATTAATGGTAC-3’
5.2试剂
5.2.1氯化钠(NaCl),CAS号7647-14-5。
5.2.2氯化镁(MgCl·6HO),CAS号7791-18-6。
22
5.2.3氢氧化钠(NaOH),CAS号1310-73-2。
1
DB22/T2260—2015
5.2.4琼脂糖,CAS号9012-36-6。
5.2.5三羟甲基氨基甲烷(Tris),CAS号77-86-1。
5.2.6十二烷基磺酸钠(SDS),CAS号2386-53-0。
5.2.7乙二胺四乙酸二钠盐(Na2EDTA),CAS号15708-41-5。
5.2.8盐酸(HCl),CAS号7647-01-0。
5.2.9三氯甲烷(氯仿),CAS号67-66-3。
5.2.10冰乙酸,CAS号64-19-7。
5.2.11无水乙醇,CAS号64-17-5。
5.2.12Tris饱和酚,CAS号108-95-2。
5.
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