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柱色谱
ColumnChromatography;了解:
1.柱色谱法分离有机物的原理。
2.固定相和流动相的选择原则。
掌握:
1.色谱柱的填充方法。
2.柱色谱分离的基本操作。;色谱法简介;;2021;柱色谱分离示意图;2021;二、实验原理;2021;2021;2021;2021;2021;2021;2021;2021;2021;2021;2021;2021;和;三、实验内容;吸附剂装填紧密,排除气泡。最终应使吸附剂的上端平整,无凹凸面,无断层。;装柱时应该注意均匀,不能有气泡,裂缝,否则样品可能顺缝隙流动而不吸附,影响样品的分离,应用质软的物体如吸耳球等轻轻敲击柱身,促使吸附剂装填紧密,排除气泡。最终应使吸附剂的上端平整,无凹凸面.
;样品为液体,可直接加样;样品为固体,可选择合适溶剂溶解为液体再加样。加样时,要沿管壁慢慢加入至柱顶部,勿使样品搅动吸附剂表面。;;洗脱时应注意:
(1)向柱内加入95%乙醇溶液洗脱(可以通过注射器沿管壁或安装滴液漏斗)在恒压或加压条件下进行洗脱。控制流出速度1滴/秒。逐渐出现色层带分离。
(2)第一色层带到达色谱柱底部时,立即用锥形瓶收集第一色层的溶液,直到其完全被洗出。【注意】洗脱时切勿使溶剂流干!
(3)然后,改用水溶液作为洗脱剂,当第二色层带到达色谱柱底部时,立即收集第二色层的的溶液,直到其完全被洗出。
(4)用量筒分别量取所分离出来的两种溶液的体积后,倒入指定的回收瓶中。
(5)分离结束后,应先让溶剂尽量流干,然后倒置,用吸耳球从活塞向管内挤压空气,将吸附剂从柱顶挤压出。使用过的吸附剂倒入垃圾桶里。;;;玻砂防堵塞
装柱需紧密
加压不可大
溶剂勿流干;色谱法在有机化学中的应用:
分离混合物
精制提纯化合物
利用比移值(Rf)鉴定化合物
跟踪反应进程;;柱色谱法分离甲基橙和甲基蓝;实验原理
;三、实验内容;仪器和试剂;装置图;实验步骤
;
实验步骤(续)
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