中山大学药学院 生物技术制药课件第4章抗体工程制药.pptxVIP

第四章抗体工程制药;（1）抗体的产生;

;（3）抗原抗体反应;以ELISA

侦测特定病原体;（5）抗体制药发展历史;McAb在免疫导向疗法中存在的问题：;解决问题的方法或途径—基因工程技术

;基因工程包括以下内容;治疗用抗体发展的三个阶段;整体水平抗体生成技术;（6）抗体制药的现状;抗体药物销售趋势图;至2010年底，全世界共有34个治疗用抗体药物批准上市。

2004年，约占全球药物市场份额的2％

2006年，单抗药物的联合销售额为200亿美元。

2008年，全球单抗药物市场规模达370亿美元

2009年，单抗药物的联合销售额为400亿美元。

2010年，全球单抗药物市场规模达480亿美元

(诊断和研究试剂的单抗药物100亿美元销售额)

2006-2012年间的年销售额增长率为14%。而同一时期，小分子药物增长率预计仅为0.6%。单克隆抗体药成为增长最快的药物;现在有5大单抗药物占据了80%的市场份额，

1.Remicade(类克,强生公司)

2.Avastin安维汀、3.Rituxan美罗华(Roche和Geneteck)

4.Humira(修美乐,雅培公司)

5.Herceptin(赫赛汀,Roche和Geneteck)

抗体药物的价格昂贵，治疗乳腺癌的Herceptin，250mg／支(15000元／支，一个疗程8支)，治疗淋巴瘤的Rituxan，400mg／支(21000元／支，一个疗程４支);

全世界正在研制的生物技术药品，25%为各类单克隆抗体。前三大生物治疗药物分别为单克隆抗体、疫苗和肿瘤坏死因子（TNF）抑制剂.

抗体市场快速增长的主要推动：一、销售持续攀升；二、新品种不断上市；三、研发方面的重金投入。

大型医药公司还会通过收购来获得对抗体新药的控制权。如最近美国强生公司收购了抗体药物研发的领头羊Centocor公司。;2016年，美国FDA批准了22个新药，其中抗体药占七席，31.82%比重。

美国ElusysTherapeutics公司的抗吸入性炭疽感染的Anthim（Obiltoxaximab）；

美国礼来公司的抗中重度银屑病药物Taltz（Ixekizumab）；

以色列梯瓦公司的血液嗜酸性粒细胞水平升高重度哮喘成人患者用药Cinqair（Reslizumab）；

瑞士罗氏公司的抗膀胱癌治疗药物Tecentriq（Atezolizumab），

瑞士罗氏和Biogen的复发缓解型多发性硬化症药物Zinbryta（Daclizumab）；

美国礼来的抗软组织肉瘤药物Lartruvo（Olaratumab）；

美国默沙东的降低梭菌毒素B感染风险药物Zinplava（Bezlotoxumab）。;（6）抗体制药－国内市场;;（6）抗体制药－国内生产研究现状;;;抗体制药的国内状态;瓶颈：大规模动物细胞培养工艺，而此类工艺属于欧美严禁出口的技术，长期以来对我国实行封锁。;（1）概念;;单克隆抗体;（2）多克隆抗体

(Polyclonalantibody);（2－2）实验室制备多克隆抗体

研究、诊断用;抗血清;（2－3）制备多克隆抗体药物

－紧急被动免疫和及紧急预防;;马血清抗毒素的两重性：

(1)特异性抗体----中和毒素

(2)异种抗原，可刺激机体产生抗马血清抗体

马血清具有立即提供保护的优势，但异种gamma-球蛋白只是短期有效，常常导致病理合并症（血清病）和过敏反应。

;人源多克隆抗体－血液制品

;（3）单克隆抗体

(Monoclonalantibody,McAb);;;(3-2)、抗原与动物免疫;免疫方法：

体内免疫:免疫原性强,抗原量多.

皮下注射,腹腔注射免疫

体外免疫:不能用体内免疫的

杂交瘤细胞株不稳定

初步免疫和加强免疫

测定抗体效价

处死小鼠,去脾细胞

;基本方法：取适量脾细胞与骨髓瘤细胞进行混合，在PEG作用下诱导它们融合，然后用培养液将PEG融合液缓慢稀释。

其他融合方法:电融合等

细胞：骨髓瘤细胞（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核苷转移酶(HGPRT)缺陷型）应和免疫动物属于同一品系，这样杂交率高。;饲养细胞：在组织培养中，单个或少数分散的细胞不易生长繁殖，若加入其他活细胞则可促进这些细胞生长繁殖，所加入的细胞称饲养细胞。常用的有小鼠腹腔巨噬细胞、小鼠脾脏细胞或胸腺细胞。

用于细胞融和的骨髓瘤细胞应具备融和率高，自身不分泌抗体，所产生的杂交瘤细胞分泌抗体的能力强且长期稳定等特点

;;;细胞融合后存在;HAT培养液：次黄嘌呤（H)、氨基蝶呤（A）、胸腺嘧啶（T)，氨基蝶呤可阻断DNA的合成。

胸腺嘧啶激酶（TK）、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）。如细胞含有此两种