分子生物学第二章 染色体与DNA课件.ppt

分子生物学第二章染色体与DNA分子生物学第二章染色体与DNA分子生物学第二章染色体与DNA2、转座作用的机制???转座时发生的插入作用有一个普遍的特征，那就是受体分子中有一段很短的（3-12bp）、被称为靶序列的DNA会被复制，使插入的转座子位于两个重复的靶序列之间。不同转座子的靶序列长度不同，但对于一个特定的转座子来说，它所复制的靶序列长度都是一样的，如IS1两翼总有9个碱基对的靶序列，而Tn3两端总有5bp的靶序列。???转座可被分为复制性和非复制性两大类。在复制性转座中，所移动和转位的是原转座子的拷贝。转座酶（transposase）和解离酶（resolvase）分别作用于原始转座子和复制转座子。TnA类转座主要是这种形式。在非复制性转座中，原始转座子作为一个可移动的实体直接被移位，IS序列、Mu及Tn5等都以这种方式进行转座。分子生物学第二章染色体与DNA分子生物学第二章染色体与DNA3.转座作用的遗传学效应①转座引起插入突变;②转座产生新的基因;③转座产生的染色体畸变;④转座引起的生物进化.名词解释复制复制体半保留复制岗崎片段复制单位θ复制先导链后随链DNA复制的转录激活DNA复制的半不连续性简答题1、图示说明DNA半保留复制的机制证明。2、DNA复制方向为5’→3’，请说明复制为什么不能从3’→5’。3、为什么岗崎证明DNA半不连续性复制的实验中出现两条链都是不连续的假象。4、DNA复制为何选择RNA作为引物？5、复制叉诞生的过程如何，后随链上都包含哪些事件（涉及的酶的情况）6、E.coli的DNA复制终止机制7、原核生物线性DNA复制5’末端短缩的解决办法有哪几种。8、真核生物端粒末端及端粒酶在DNA末端复制过程中的作用机制9、真核生物DNA复制过程中核小体复制和保留机制。10、保证复制忠实性的主要机制11、真核与原核复制起始调控的差别12、真核与原核复制的比较分子生物学第二章染色体与DNA⑸.单链结合蛋白结合于单链。⑹.引物合成酶（DnaG蛋白）开始合成RNA引物。（前导链）⑺.滞后链的引发：由引发体（primosome）完成。引发体由六种蛋白质组成，蛋白质n、nˊ、n〞、DnaB、C和I合成一起。并与引发酶组装成引发体，才发挥功效。引发体能够前进，不断合成RNA引物。分子生物学第二章染色体与DNA2.链的延长（冈崎片段的合成）真核生物的冈崎片段为：100-200bp原核生物的冈崎片段为：1000-2000bp分子生物学第二章染色体与DNADNA链的延伸在DNA聚合酶Ш的催化下，以四种5’-脱氧核苷三磷酸为底物，在RNA引物的3’端以磷酸二酯键连接上脱氧核糖核苷酸并释放出焦磷酸。DNA链的延伸同时进行前导链和滞后链的合成。两条链方向相反。前导链滞后链冈崎片段半不连续复制冈崎模型分子生物学第二章染色体与DNA冈崎片段引物的切除、缺口的填补和切口的连接:引物的切除：RNaseH降解缺口的填补：DNA聚合酶I（DNApolymeraseI）切口的连接：DNA连接酶（DNAligase）分子生物学第二章染色体与DNA分子生物学第二章染色体与DNA3.复制的终止终止：Tus蛋白，遇到20bp重复性终止子序列（Ter）,Tus–Ter复合物能阻挡复制叉继续前进。分子生物学第二章染色体与DNA真核生物DNA复制的特点：区别于原核生物的特点：①有多个复制起始点②多个复制进程同时进行③复制起始点需要起始原点识别复合物的参与④复制叉移动的速度比原核慢，但数量多⑤DNA聚合酶种类不同，五种聚合酶αβγδε⑥端粒的复制依赖于端粒酶分子生物学第二章染色体与DNA种类αβγδε亚基数44425分子量（KD)＞25036-38160-300170256细胞内定位核核线粒体核核5′→3′聚合活性＋＋＋＋＋3′→5′外切活性－－＋＋＋功能复制、引发修复线粒体复制复制去除引物，缺口补全分子生物学第二章染色体与DNA（六）DNA复制的调控大肠杆菌染色体复制调控： 复制的调控主要是复制子发挥作用的。复制子包括起始位点和复制起点，前者编码调节蛋白，后者与调节蛋白结合。如果有突变体，那么复制出现问题。 还有一种主要是通过反义RNA调节复制的速度。分子生物学第二章染色体与DNA真核生物DNA复制的调控真核生物复制共有三个水平的调控：1.细