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小肠平滑肌的生理特性和药物的影响
姓名:学号:班级:
实验目的
学习离体肠平滑肌器官灌流的实验方法。
观察豚鼠离体小肠平滑肌的一般生理特性。
观察药物对豚鼠离体小肠平滑肌生理特性的影响。
实验材料
实验动物:豚鼠
器材:小肠平滑肌恒温水浴装置,球胆(气泵或氧气筒),张力换能器,烧杯,温度计,注射器,注射针头,棉线,手术剪,培养皿,滴管。
药品:台式液,10-5mol/L乙酰胆碱,10-4mol/L苯海拉明,10-5mol/L磷酸组胺,10-3mol/L硫酸阿托品,1%BaCl2溶液。
实验方法和步骤
豚鼠离体肠平滑肌的制备
以手倒提豚鼠,用木槌猛击其头后部令其急死,立即剖开腹腔,轻轻剪取回肠,迅速置于冷台式液中,除去肠系膜,并将肠管剪成数段,用台式液将肠内容物冲洗干净,然后剪成小段备用。注意操作应轻柔。
实验装置的准备
此装置由恒温、供气、供液和排液以及记录部分组成。浴槽内水温由恒温装置控制在37±0.5℃。浴管与浴槽相连,以使浴管内营养液保持同样的恒温。气源(充气气囊或气泵等)与浴管相连,气流量以1~2个小气泡为宜。浴管下端与排液管相连,其上端管口处可随时充入新的恒温营养液。
标本连接及记录
轻取一段标本,一端用线系在装置的小钩上,对角线方向将另一端用与张力换能器相连的小钩钩住,慢慢放入浴管中并调节其紧张度至适宜,此时标本通过张力换能器与计算机相连。标本连接好后向浴管内充入37±0.5℃营养液,适应10~15min后,描记一段离体回肠平滑肌正常收缩曲线。
如果环境适宜,标本存活,适应10~15min后,描记一段正常曲线,然后按如下步骤给药。
加入药物观察并记录曲线
加入10-5mol/L乙酰胆碱0.2ml,待收缩到最高点时,加入10-3mol/L硫酸阿托品0.1ml,然后再加入同量的乙酰胆碱,观察结果。实验完毕后冲洗浴管三次。
加入10-5mol/L磷酸组胺溶液0.3ml,待收缩到最高点时,加入10-4mol/L苯海拉明0.3ml,3min后再加入同量的磷酸组胺溶液,观察结果。实验完毕后冲洗浴管三次。
加入1%BaCl2溶液1ml,作用达到最高点时,加入10-3mol/L硫酸阿托品0.1ml,再加入10-4mol/L苯海拉明0.3ml,观察结果。
实验结果
0.2ml乙酰胆碱-0.1ml硫酸阿托品-0.2ml乙酰胆碱
0.3ml磷酸组胺溶液-0.3ml苯海拉明-0.3ml磷酸组胺溶液
在使用取回的第二段小肠后,尤其注意在系线过程中,不用金属镊子操作,不在空气中过久暴露小肠,所有的步骤应轻柔完成避免对小肠造成不可逆性损伤,小肠要在水温为37±0.5℃且有通气的条件下才能正常进行收缩舒张运动。
参考目录
朱大年,王庭槐.生理学.第8版[M].人民卫生出版社,2013.PP187~188
杨宝峰.药理学.第8版[M].人民卫生出版社,2013.PP52,66,285~286
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