植物病毒病害及脱毒.pptVIP

因此，在采用茎尖培养脱毒时，要兼顾脱毒率、成活率及茎尖发育成完整植株的能力。茎尖应以大到足以脱毒、小到足以发育成完整植株为前提，一般切取长度为0.2～0.5mm、带有1-2个叶原基的茎尖作为培养材料。百合茎尖剥离培养一周后培养三周后芽增殖培养条件：光培养的效果通常比暗培养好。

外植体的生理状态选择活跃生长的芽，培养顶芽茎尖比培养腋芽茎尖效果好。

取芽的时间一般选作萌动期较好。茎尖培养的生长可能有四种类型:组织不增大,不久变褐死亡----可能是生长点受到损伤所致;

组织逐渐变绿,但体积增大缓慢-----可把组织转到NAA浓度高于0.05mgL-1的培养基上,并提高温度以加速生长。组织基部不产生或少产生愈伤组织,生长点发育正常,一个月可形成无根的小植株-----最理想的情况-----当长有2~3片小叶时,应转移到无生长素的培养基上促进生根。茎尖基部产生大量的愈伤组织,而生长点很少生长---不理想----把愈伤组织转移到无生长素的培养基上,并降低培养温度,以抑制愈伤组织的生长,促进其分化。愈伤组织培养脱毒

通过植物的器官和组织的培养去分化诱导产生愈伤组织。然后从愈伤组织再分化产生芽，长成小植株，可以得到无病毒苗。感染烟草花叶病毒的愈伤组织经机械分离后，仅有40%的单个细胞含有病毒，即愈伤组织无病毒植株。茎尖微体嫁接

微体嫁接是组织培养与嫁接技术相结合而获得无病毒种苗的一种方法。微体嫁接脱毒是在无菌条件下，将切取的茎尖（未感染病毒病的植株）嫁接到试管中培养的砧木苗（或实生苗）上，待其愈合发育为完整植株而达到脱毒的效果（木本植物茎尖培养难以生根成植株）。第九章

植物病毒病害及病毒脱除第一节植物病毒病害的概述

目前在高等植物中，发现的病毒病已超过700种，数量仅次于真菌性病害。

植物病毒病概念

指由病毒和类似病毒的微生物如类病毒、植原体、螺原体以及类细菌等引起的一类植物病害。植物病毒必须在寄主细胞内营寄生生活，专一性强，某一种病毒只能侵染某一种或某些植物，但也有少数为害广泛。二、植物病毒病症状

受害植物常表现如下症状：

1．变色

2．坏死

3．畸形Symptomsofcommonviraldiseases植物病毒症状黄瓜花叶病毒病：皱缩,卷叶,黄化褪绿大白菜病毒病辣椒病毒病萝卜花叶毒病番茄病毒病黄瓜花叶病毒病：植物病毒感染方式植物病毒通过寄主的伤口感染----农田操作、人工移植、摘心、整枝、打杈。

植物病毒通过动物传播感染--传播介体除昆虫外，还有真菌、线虫、菟丝子等。

植物病毒通过染病植物营养器官传播—营养繁殖体感染下一代。

种子和花粉传播—部分豆科植物的种子。目前，在生产上尚无特效药彻底消除植物体内的病毒，但通过组织培养却可以实现消除植物体内的病毒；因此，组织培养脱毒显得非常重要；PARTONE第二节植物脱毒技术

植物脱毒的机理

病毒在植物体内的分布是不均匀的，在茎尖中呈梯度分布。在受侵染的植株中，顶端分生组织无毒或含毒量极低。较老组织的含毒量随着与茎尖距离的加大而增加。植物细胞分裂和病毒繁殖之间存在着竞争。在旺盛分裂的细胞中植物核蛋白合成占优势，在细胞伸长生长期间病毒核蛋白合成占优势。病毒在植物体内的传播主要是通过维管束实现的，但在分生组织中，胞间连丝和维管组织还不健全。在茎尖中存在高水平内源生长素，可抑制病毒的增殖。茎尖培养主要用于消除病毒以及类病毒、类菌质体、细菌和真菌等病原物。010302植物脱毒的方法

物理脱毒法

热处理脱毒

植物组织处于高于正常温度的环境中，组织内部的病毒受热以后部分或全部钝化，但寄主植物的组织很少或不会受到伤害。但每种植物都有其临界温度范围，超过这一临界范围或在此范围内处理时间过长，都会导致寄主植物组织受伤。为此可使用变温的处理方法，高（40℃）和低温（16～20℃）交替处理，既能保证植物材料不受伤害，又能除去病毒。温汤浸渍处理适用于休眠器官、剪下的接穗或种植的材料，在50℃左右的温水中浸渍10分钟至数小时，方法简便易行，但易使材料受伤。热空气处理热空气处理对活跃生长的茎尖效果较好，将生长的盆栽植株移入温热治疗室（箱）内，一般在35～40℃，短则几十分中长可达数月。植物生长区与热处理区关系温度生长量热处理区病原菌被消除寄主被杀死低温处理脱毒

低温处理亦称冷疗法，菊花植株在5℃下，经4～7.5个月处理后，切取茎尖进行离体培养，可以有效去除菊花矮化病毒与菊花褪绿斑驳病毒，仅茎尖培养则无此效果，目前低温脱毒的报道尚少，但不失为一种脱毒的方法。化学脱毒法化学脱毒法的代表是抗病毒药剂处理脱毒。用于植物脱毒的抗病毒药剂主要包括嘌呤和嘧啶类似物、