植物组织培养第一章实验室的设计于基本操作.ppt

三、培养基及其配制陈传红制作2007/5培养基的种类及其组成培养基种类：基本培养基、完全培养基。培养基（Medium）：植物组织培养离体材料赖以生存的“土壤”，是外植体生长的营养物质。基本培养基组分：大量元素、微量元素，维生素和氨基酸，糖和水。基本培养基最常用的有十几种，如：MS，改良MS，White，改良White，Nitsch，MT，N6，B5，NT，Blaydes等。完全培养基：在基本培养基上根据不同要求附加一些植物生长调节物质以及其它的一些有机附加产物。根据物理性质分为：固体和液体培养基，固体培养基是在液体培养基基础上添加有凝固剂所致的。培养基四种母液陈传红制作2007/5大量元素：其浓度大于0.5mmol/L的植物必须需元素。他们占植物体干重的百分之几十至万分之几。如：氧、碳、氢、氮、钾、磷、镁、硫、钙。微量元素：其浓度小于0.5mmol/L的植物所需的元素。如：硼、锰、锌、钼、铜、钴、铁、氯等。铁盐：用FeSO4·7H2O与EDTA（乙二胺四乙酸二钠）配成的鳌合铁。010302有机成分陈传红制作2007/5生素：硫胺素（VB1）、吡哆醇（VB6）、烟酸（VB3）、泛酸钙（VB5）、生物素（VH）、钴胺素（VB12）、叶酸（VBc）、抗坏血酸（VC）等等，用量一般为0.1～1.0mg/l。1是以各种辅酶的形式参与多项代谢活动，对生长、分化等有很好的促进作用。基酸：甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、谷酰氨、门冬氨酸、门冬酰氨、丙氨酸等。2常用水解酪蛋白和水解乳蛋白，它们是含有约20种氨基酸的混合物，用量在10～1000mg/l之间。3030201醇（环已六醇）：它在糖的互相转化中起作用。在适当的情况下使用，能促进愈伤组织生长、胚状体和芽的形成。用量为50～100mg/l。呤及其硫酸盐：可促进芽的形成和生长，难出芽的植物可试用。附加产物：椰乳、香蕉、麦芽提取物、酵母提取物、马铃薯块等，它们对培养的某些植物的器官、组织或细胞有一定的促进生长的效应。其他陈传红制作2007/501020304糖：糖作为碳源，为细胞提供合成新化合物的碳骨架，为细胞的呼吸代谢提供底物与能源，还用于维持一定的渗透势。糖的用量一般为2～5％。常用的碳源：蔗糖，葡萄糖和果糖也较常用。琼脂：在固体培养时琼脂是作为固化剂。05用量一般在6～10g/L之间。（6）植物生长调节物质陈传红制作2007/5①?生长素类主要生理作用：ⅰ促进细胞伸长生长和细胞分裂；ⅱ诱导受伤组织形成愈伤组织；ⅲ促进生根;ⅳ促进植物性别分化，使形成的雌花雌株较多;ⅴ防止落花、落果;ⅵ促进无籽果实的形成等等。生长素类在组织培养中的作用ⅰ诱导愈伤组织；ⅱ诱导根形成；ⅲ与细胞分裂素配合使用，诱导不定芽的分化，侧芽的萌动与生长，以及胚状体的形成等。常用的种类有：吲哚乙酸（IAA）、吲哚丁酸（IBA）、萘乙酸（NAA）、2，4－二氯苯氧乙酸（2,4-D）等。活性比较：2，4－D﹥IBA和NAA﹥IAA。123654一般在诱导愈伤组织时使用，而诱导分化阶段则只使用NAA和IBA。2，4－D的副作用较大，使用的浓度较窄，浓度高有毒害作用，同时有抑制芽的形成作用。相同浓度下，以IAA的相对活性为1，则NAA为3～4，2，4－D则为10～20。胞分裂素类主要生理作用：ⅰ促进细胞分裂与扩大，可使茎增粗，而抑制茎伸长；ⅱ诱导芽的分化，促进侧芽萌发生长，当组织内细胞分裂素/生长素的比值高时，诱导芽的分化，这时细胞分裂素起着主导作用；ⅲ抑制衰老，可延缓衰老过程，有保鲜产效果。常用的细胞分裂素有：01020304苄基腺嘌呤（BA或BAP）异戊烯基腺嘌呤（2-ip）糠基腺嘌呤（KT）05玉米素（ZT）陈传红制作2007/5③赤霉素类主要生理作用：ⅰ诱导茎的细胞伸长，对根则无效，对矮生型植物恢复成高生型特别有效，植物组织培养中常用来促进幼苗茎的伸长生长；ⅱ对形成层的细胞分化有影响，往往同生长素有协同作用，IAA/GA比值高有利于木质部分化，比值低有利于韧皮部分化；ⅲ代替低温和长日照，使一些两年生植物在当年就开花，可加快育种进程；ⅳ打破种子、块茎、鳞茎等休眠，使之提前萌发。ⅴ对生长素和细胞