液相色谱柱的应用.ppt

固定相键合二甲基硅烷封端四甲基硅烷SiOOHOOCH3SiRCH3CH3SiCH3CH3SiRCH3R=C8,C18,etc.OOHOHOCH3SiRCH3CH3SiRCH3++ClCH3SiCH3CH3OHOHOHOHCH3ClRCH3(TMS)传统键合及封端技术第62页，共111页，星期日，2025年，2月5日三基封端技术（酰胺基）PG=极性酰胺基，R1=空间保护的异丙基，R=烷基链柱子稳定性更好，寿命更长第63页，共111页，星期日，2025年，2月5日超临界封端技术传统封端：固-液回流封端，封端试剂和催化剂溶于有机溶剂中（甲苯），与键合相在有机溶剂沸腾温度回流数小时至数天不等。硅胶小孔难到达。超临界封端：封端试剂和催化剂由CO2超或亚临界流体传递，封端试剂在超或亚临界流体状态下扩散系数是固-液回流状态的1000倍，能充分扩散到硅胶表面和小孔内部，只需要数小时就可以最大限度封闭活性硅羟基。第64页，共111页，星期日，2025年，2月5日碱灭活测试色谱柱Diamonsil（钻石）C185um，250x4.6mm流动相CH3OH/H2O(49:51)流速1.0mL/min检测UV@254nm如果硅胶表面已经被完全化学改性，乙基苯胺的三个异构体将不会与硅胶发生非极性作用力，所以不会分离并共同洗脱出来。第65页，共111页，星期日，2025年，2月5日封端技术比较第66页，共111页，星期日，2025年，2月5日保留值与pH的关系pH变化值0.1RS变化值1.6色谱柱：C184.6X250mm,5um流动相：27%甲醇：73%磷酸pH2.52.6温度：500C流速：1.0mL/min.第67页，共111页，星期日，2025年，2月5日保留值与pH的关系12346750123456Time(min)01234561234675Time(min)pH7.00pH7.25色谱柱:XDB-C84.6x75mm,3.5μm流动相:44%25mM磷酸,pH7.00:56%甲醇流速:1.0mL/min温度:25°C检测:UV250nm可电离的组份的分离可能会随pH变化发生显著变化—甚至很小的0.05–0.25个pH变化单位.样品:ketoprofenethylparabenHydrocortisonefenoprofenpropylparabenPropranololibuprofen0.25个pH第68页，共111页，星期日，2025年，2月5日pH值对保留时间的影响碱性条件保留时间随PH变化明显，PH变化0.2，保留时间变化1.2min。保留时间随PH变化不明显酸性条件保留时间随PH变化明显第69页，共111页，星期日，2025年，2月5日保留值与pH的关系保留时间酸性组份中性组份碱性组份第70页，共111页，星期日，2025年，2月5日复杂组分的流动相pH选择技巧色谱柱:Extend-C184.6x150mm,5mm流动相:30%缓冲液:70%MeOHpH7缓冲液20mMNa2HPO4pH11缓冲液20mMTEA流速:1.0mL/min

温度:RT 检测器:UV254nm0512,345Time(min)76C18pH71.Maleate马来酸盐2.Scopolamine东莨菪碱pKa7.63.PseudoEphedrine假麻黄碱pKa9.84.Doxylamine抗敏安(多西拉敏)pKa9.25.Chlorpheniramine氯苯吡胺pKa9.16.Triprol内径ine苯丙烯啶pKa6.57.Diphenhydramine苯海拉明pKa9.0C18pH