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1关于一种新型溶栓酶——纳豆激酶的简介

目录背景介绍壹传统溶栓药物贰新型天然溶栓酶叁参考文献肆2

背景介绍3

血管栓塞类疾病现状全世界每年约有2600万人因血栓类疾病死亡，我国心脑血管疾病死亡人数占因病死亡总人数的40.7%，居死因之首。4

血栓形成机制血小板红细胞凝血因子凝血因子与抗凝血因子平衡打破纤维蛋白单体聚合形成多聚体产生血栓的核心基质5

传统溶栓药物6

溶栓药物的作用机理溶栓药物主要依靠溶栓系统机制进行血栓的降解，传统药物传统溶栓药物主要依靠激活纤溶酶原产生纤溶酶通路进行血栓降解，新一代的溶栓药物则直接或间接作用于纤维蛋白（Pm）。新型药物7

传统溶栓药物第一代溶栓药物第二代溶栓药物第三代溶栓药物降解纤维蛋白同时也降解纤维蛋白原，易致全身纤溶，安全性较差。与纤维蛋白原亲和力低，高的纤维蛋白选择活性半衰期短，短时间内需大量用药，且价格昂贵，有一定的出血副反应快速，特异性强，安全性高，是当前溶栓药物的主体整体来说存在半衰期短、成本高等问题8

新型天然溶栓酶9

新型天然溶栓酶纳豆激酶（NK）蚯激酶（LK）单环刺螠溶栓酶吸血蝙蝠唾液溶栓酶原激活剂纳豆激酶优点：与其他纤维蛋白溶解酶（如尿激酶，第一代溶栓药物）相比，具有无副作用，成本低，寿命长的优点，是一种有潜力的治疗心血管疾病的药物。10

纳豆激酶结构纳豆激酶由275个氨基酸组成，分子量为27.7kDa，pI为8.6。纳豆激酶在pH5.5?9.0时显示出相当大的活??性。强碱破坏其功能和结构稳定性，当温度超出60℃其活性降低Ser-His-Asp催化三联体，是纳豆激酶催化活性的中心ZhengZL,ZuoZY,LiuZG,TsaiKC,LiuAF,ZouGL(2005)Constructionofa3Dmodelofnattokinase,anovelfibrinolyticenzymefrom?Bacillusnatto.Anovelnucleophiliccatalyticmechanismfornattokinase.JMolGraphModel23(4):373–380Asn155作为氧离子洞11

纳豆激酶作用机理内源性尿激酶纤溶酶原激活物抑制剂纳豆激酶尿激酶纤溶酶纤维蛋白降解纤维蛋白纤溶酶原激活物纤溶酶原纳豆激酶ＮＫ可以直接激活纤溶酶原（Pg）产生纤溶酶（Pm）从而降解血栓，也可直接对纤维蛋白进行降解，是研究较早且较完善的天然溶栓酶WengY,YaoJ,SparksS,WangKY.Nattokinase:AnOralAntithromboticAgentforthePreventionofCardiovascularDisease.Arráez-RománD,ed.InternationalJournaofMolecularSciences.2017;18(3):523.12

纳豆激酶生产1、基因工程重组生产纳豆激酶大肠杆菌提取纯化困难NK活性低中国大肠杆菌不溶且非活性包涵体（重组NK蛋白聚集体）分离出NK基因，与周质分泌信号、PeLB、天然NK信号肽结合改进细胞外蛋白酶缺陷型枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌启动子(TACAAT)—10元件被共有的—10区（TATAAT）替换NK表达增加会同时产生水解NK的天然的细胞外蛋白酶改进acoA启动子的控制高产不适合大规模的工业生产产生存在的问题2113

纳豆激酶生产1、基因工程重组生产纳豆激酶——基因重组提高纳豆激酶产量CaiD1,ZhuC1,ChenS2.Microbialproductionof?nattokinase:currentprogress,challengeandprospect.WorldJMicrobiolBiotechnol.2017May;33(5):8414

纳豆激酶生产2、植物分子农业（PMF）烟叶2、纳豆激酶必须及时收取;否则会受到蛋白水解利用植物系统产生人类药用重组蛋白通过黄豆矮病毒（BeYDV）的DNA复制系统1、NK被细胞壁包被，经胃肠道时被保护1、纳豆激酶被蛋白糖基化，患者注射产生副作用：免疫原性克服手段口服给药；经消化系统消耗时不会诱导免疫原性反应在植物种子中表达重组蛋白3、纳豆激酶的下游加工和纯化昂贵克服手段克服手段在食用植物中生产，未加工的植物材料作为重组蛋白口服递送药剂优点缺点15

纳豆激酶提取分离传统的提取分离方法有机溶剂分馏，盐析和蛋白质亲和层析等存在的问题蛋白质回收率低和操作复杂目前发现的优化策略1、通过使用膨胀床方法，从